【摘 要】
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用双层琼脂扩散法检测海洋放线菌M023、M056、M058、M066、M220、M230的抗菌谱,部分菌株具有一定抑菌活性,其中M058对金黄色葡萄球菌(革兰氏阳性球菌)、假单胞菌有较强的抑菌
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用双层琼脂扩散法检测海洋放线菌M023、M056、M058、M066、M220、M230的抗菌谱,部分菌株具有一定抑菌活性,其中M058对金黄色葡萄球菌(革兰氏阳性球菌)、假单胞菌有较强的抑菌作用,对大肠杆菌(革兰氏阴性细菌)、白色念珠菌(酵母状真菌)也有抑制作用,而对铜绿假单胞菌抑制作用相对较弱,以对金黄色葡萄球菌的抑菌活性尤为明显,是一株具有广谱抗菌活性的菌株,因此对M058进行了进一步的研究.通过观察菌丝形态、孢子形状、在不同培养基上的培养特征及明胶液化、淀粉水解、纤维素上生长情况、H<,2>S的产生、碳源利用一系列生理生化特征,按照《链霉菌鉴定手册》将M058菌株初步归类为链霉菌属金色类群,类似菌:金色链霉菌Streptomyces aureus.为提高抗生素产量,对M058的液体培养基成分进行了优化.通过杯碟法检测发酵液中抗生素的含量,筛选出最佳碳源为可溶性淀粉,最佳氮源为硝酸钾,通过改变碳、氮比及进行碳、氮源及磷酸盐的正交实验,获得碳源、氮源及磷酸盐配比为:可溶性淀粉1％,KNO<,3>0.15％,K<,2>HPO<,4>0.075％.发酵工艺条件的研究结果表明最适初始pH为7.0~7.5,最适温度为25℃,最适接种量为10％,250ml的三角瓶装入50 ml为最佳装液量.在优化后的培养基和最佳发酵条件下,36~48小时抗生素的分泌量达到最高峰,为获得大量抗生素,采取工艺放大,进行罐发酵,在发酵液中抗生素活性达到高峰时结束发酵,放罐.将发酵液除菌体后进行浓缩、采用乙酸乙酯分级萃取、活性炭吸附除盐,丙酮溶液洗脱的方法获得酯溶性抗生素粗品A和水溶性抗生素粗品B,经检测粗品A和B均对金黄色葡萄球菌均有抑制作用,同时通过GF254高效硅胶板检测出A、B所含组分,选用200-300目硅胶柱,通过柱层析的方法使粗品A和B各个组分得到了初步分离,探索了抗生素粗品A、B的初步纯化方法,获得抗生素粗品A、B的部分理化性质,为进一步纯化奠定基础.
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