乳酸菌是微生态制剂中最常用的一种,应用到水产养殖中有改善水质、调节微生态平衡、提高机体免疫力等多种有益作用。但目前实验室用于生产乳酸菌的培养基成本较高,且喷雾干燥法及真空冷冻干燥法等保藏方法存在设备成本高,工艺调控复杂等缺点,不利于乳酸菌的工业化生产。本试验对乳酸菌高密度培养及保藏工艺进行研究,旨在降低乳酸菌的生产及保藏成本,提高发酵液活菌数,推动乳酸菌在水产养殖上的广泛应用。在250 mL摇瓶中对保加利亚乳杆菌1.2902的培养基成分进行优化,优化后的培养基配方为:葡萄糖30 g/L、豆粕28 g/L、玉米粉14 g/L、乳清粉28 g/L、K₂HPO₄ 3.0 g/L、柠檬酸三铵2.5 g/L、乙酸钠5 g/L、吐温-80 1.25 mL/L、MgSO₄·7H₂O 0.2 g/L、MnSO₄·4H₂O0.0625 g/L,培养36 h,发酵液中的活菌数为5.376×10⁹ CFU/mL,优化后的培养基成本较原MRS培养基降低了4000元/t;优化后的培养条件为:温度37℃、初始pH 7.1、接种量4%（v/v）、静置培养,在上述培养条件下培养该菌36 h,发酵液中的活菌数为6.07×10⁹ CFU/mL,明显高于原MRS的5.8×10⁸ CFU/mL。在5 L发酵罐中对菌体高密度发酵工艺研究表明:恒定pH 6.5、通气量2 L/min,叶轮搅拌速度200 r/min、20%的碳酸钠作为中和剂时,发酵罐中的活菌数最高,培养30 h,活菌数达1.48×10¹00 CFU/mL,明显高于摇瓶中的6.07×10⁹ CFU/mL,且较摇瓶培养时间缩短6 h。菌体液态保藏工艺研究表明:在4℃条件下,离心转数4000 r/min、离心时间20 min时,菌体的离心收得率最高,达到92.37%;0.01 mol/L PBS溶液作为保护介质时,4℃保藏一周后,菌体的存活率最高为14.37%;在0.01 mol/L PBS的保护介质溶液中,海藻糖2.02%,抗坏血酸钠1.72%,谷氨酸钠1.06%作为保护剂时,4℃下保藏4周后,菌体存活率为30.89%,较原液保藏的存活率提高了29.64%。在饲料中分别添加不同浓度的保加利亚乳杆菌1.2902养殖罗非鱼60天,结果表明:与对照组相比,实验组罗非鱼的增重率和特定生长率,肠道中的乳酸菌数量、脂肪酶、淀粉酶和胰蛋白酶活性,肝胰脏中的胰蛋白酶活性、血清中的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、溶菌酶、超氧化物歧化酶、丙二醛及过氧化氢酶活性均有不同程度的提高,而饲料系数、肠道中弧菌数量、总细菌数均有不同程度降低。因此,在饲料中添加保加利亚乳杆菌1.2902可以促进罗非鱼的生长和消化、增强罗非鱼的免疫力。