本论文通过两个实验研究了蛋氨酸对羽毛发育的影响,从羽毛发育的角度探讨北京鸭蛋氨酸需要量,通过酶联免疫和蛋白质组学等方法综合研究蛋氨酸对羽毛角蛋白组成的影响及其分子机理。同时构建北京鸭游离毛囊体外培养模型,并对其进行形态学和组织学观察。　　 试验一研究了蛋氨酸对生长前期北京鸭羽毛发育的影响。结果表明,蛋氨酸水平对于绒羽千朵重、绒羽长和正羽百根重、正羽长均具有显著影响(P<0.05)。羽毛总重和绒羽指标随日粮蛋氨酸水平表现为显著的二次曲线变化规律(P<0.05),依据二次曲线模型,达到最佳羽毛总重的蛋氨酸需要量为0.476％,达到最佳绒羽长和绒羽千朵重的蛋氨酸需要量分别为0.482％和0.485％。可见,绒羽良好发育可能需要更高水平的蛋氨酸。日粮蛋氨酸水平对于生长前期北京鸭正羽和绒羽含硫量影响不显著(P>0.05),而绒羽含硫量显著高于正羽(P<0.05)。日粮蛋氨酸水平对肝脏中胱硫醚合酶(CBS)活性具有显著影响(P<0.05),对皮肤CBS活性影响不显著(P>0.05)。皮肤中的CBS活性极显著高于肝脏中CBS活性(P<0.01)。通过对正羽和绒羽角蛋白进行蛋白质组学分析。运用Image Master2D Elite5.0分析软件,对高蛋氨酸正羽组、低蛋氨酸正羽组、高蛋氨酸绒羽组和低蛋氨酸绒羽组双向凝胶电泳的银染图谱进行图像匹配分析。结果显示低蛋氨酸正羽组与高蛋氨酸正羽组之间差异表达蛋白共19个:其中7个只在低蛋氨酸组表达,8个只在正常蛋氨酸组表达。其余4个差异点在低蛋氨酸组表达上调(表达量高于正常蛋氨酸组3倍以上)。低蛋氨酸绒羽组与正常蛋氨酸绒羽组之间差异蛋白11个。其中4个只在低蛋氨酸组表达,3个只在正常蛋氨酸组表达。其余4个差异点中有1个在正常组表达上调,3个在低蛋氨酸组表达上调。综合考虑差异性和蛋白点大小,选出16个差异蛋白点,运用MALDI-TOF-MS／MS进行肽指纹图谱鉴定。通过对不同蛋氨酸水平下的正羽和绒羽图谱比较,并未发现具有显著差异(3倍以上)的角蛋白点。可见,蛋氨酸水平并不会对正羽和绒羽的角蛋白组成产生影响。通过对正羽和绒羽图谱比较,发现绒羽中KRT86和KRT9较正羽表达量高(3倍以上)。综上所述,蛋氨酸水平显著影响生长前期北京鸭正羽长、正羽百根重、绒羽长和绒羽千朵重；绒羽良好发育需要的蛋氨酸水平比正羽高；皮肤中CBS活性显著高于肝脏并且维持相对稳定,这使得羽毛含硫量和角蛋白组成维持稳定。　　 试验二的内容是构建北京鸭游离毛囊体外培养模型并进行形态学和组织学观察。结果表明,在无血清DMEM培养基中,北京鸭次级毛囊出现不同程度的生长。前3天平均生长速度为0.156mm／d,4天后生长速度迅速下降,5天后毛囊形态开始发生改变。初级毛囊未生长即进入衰退期。总之,北京鸭次级毛囊能够在DMEM培养基中生长,初级毛囊不能生长。因为可能是初级毛囊形态发生复杂,DMEM无血清培养基中缺乏其必需的生长因子。