本文依据松口蘑Tricholoma matsutake子实体及其分离物的形态特征，结合分子生物学手段，分析它们之间的遗传相似性，用以鉴别子实体和分离物之间的亲缘关系，并对松口蘑菌种的分离、培养及原生质体的制备进行了研究。采用组织分离法对鲜松口蘑子实体菌褶、菌盖、菌盖和菌柄连接处、菌柄中部及菌柄下部5个部位进行组织分离，分别接种在PDA、PDA＋VB₁＋VB₃、PDA＋黑木耳二级种浸出液＋麦麸、滨田、滨田＋VB₁、BM及BM＋VB₃ 7种培养基上培养。25d后只有菌褶部位的组织萌发出菌丝体，子实体其它部位没有萌发出菌丝体：PDA＋黑木耳二级种浸出液＋麦麸培养基上菌丝萌发率最高。通过对松口蘑子实体和分离物的显微镜观察，比较两者的形态特征，初步确定分离物为松口蘑菌丝体；进一步利用RAPD技术分析分离物与子实体之间的亲缘关系。采用40条随机引物进行引物筛选，其中有17条引物扩增出清晰而稳定的DNA指纹图谱。以子实体和分离物的总DNA为模板，利用筛选出的17条有效引物进行亲缘关系鉴定，用NTSYS-PC软件中的SIMQUAl程序计算DNA指纹间的相似系数，按UPGMA法构建树图。结果表明：松口蘑子实体与分离物的DNA指纹相似系数为1.00，进而断定分离物为松口蘑菌丝体。通过生长速度测定，筛选松口蘑菌丝体生长的适宜培养基、pH值和温度。结果表明：松口蘑菌丝体在PDA培养基上生长最快，其次是PDA＋VB₃培养基、磷酸二氢钾＋硫酸镁＋麦芽糖＋葡萄糖＋VB₁＋酒石酸氨培养基和滨田培养基，在PDA＋黑木耳二级种浸出液＋麦麸培养基上最慢；松口蘑较适pH为5.0～6.0，生长适宜温度为23℃。通过对菌丝产量的测定，筛选出松口蘑菌丝体生长最佳液体培养基为PDA。对液体培养基进行营养成分的优化组合、多重比较分析，适宜的组合为马铃薯400g／L，葡萄糖30g／L。采用溶壁酶和蜗牛酶，在30℃水浴，pH为6.5条件下，以0.6mol／L MgSO₄作为渗透压稳定剂，制备松口蘑原生质体。溶壁酶的效果好于蜗牛酶，溶壁酶浓度对原生质体产量的影响在本实验范围内不显著，但酶解时间对原生质体产量的影响达到了极显著水平，酶解时间为3h时，原生质体的平均产量最高，为2.65×10⁷个；0.4mol／L的甘露醇为渗透压稳定剂时，松口蘑原生质体的产量最高。