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为了解鲸类动物体内铁的积累和血清转铁蛋白的特点,本硕士论文首次进行了中华白海豚体内各组织或器官的铁浓度,瓶鼻海豚和糙齿海豚的血清铁含量、总铁结合力和铁饱和度,瓶鼻海豚、糙齿海豚和长江江豚血清转铁蛋白的PAGE电泳特点和多态性,瓶鼻海豚血清转铁蛋白的分子量、等电点等方面的探索和研究。
虽然中华白海豚XM20040429和XM20040430年龄、体重、体长相差显著,但组织或器官中铁浓度的分布类型却相类似,即血液、肝脏、肺和肾脏中较其它器官或组织含有更多的铁元素。铁浓度较高的组织或器官有肝脏、血液、肺和肾脏,浓度范围427.4-2968.2μg/g。中等浓度的组织有肌肉、胰和心脏,浓度范围179.6-393.4 μg/g。低浓度的组织有胃、肠、脑和皮肤,浓度范围51.8-199.8μg/g,反映了不同组织或器官的不同生理功能需要。此外,成年个体XM20040430中肝、胰和肾中铁的含量明显高于幼年个体XM20040429,分别为后者的2.89、1.95、1.39倍。
3 头瓶鼻海豚(LE、LU、BE)和1头糙齿海豚总体的血清铁浓度范围为23.6-45μmol/L,总铁结合力的范围为52-75 μmol/L,铁饱和度的范围为38.69-74.60%。其中血清铁和铁饱和度总体高于用于对照研究的鱼类,反映出海豚血清转铁蛋白的活性及血清中铁的利用率总体较高。其机体可以通过提高血清铁和铁饱和度,提高鲸类的呼吸效率和潜水能力,应对潜水时血液中氧含量降低,从而有效适应水生生活。
PAGE电泳结果表明瓶鼻海豚、糙齿海豚和长江江豚的血清转铁蛋白均为β-球蛋白,具有4-7条带,多于用于对照研究的白缘<鱼央>、中华鲟、革胡子鲇等鱼类及人、黄牛、水牛等陆生哺乳动物,且分布范围较宽。糙齿海豚的血清转铁蛋白条带较瓶鼻海豚深和宽,可能表明其活性高于后者,与铁饱和度的结果一致。瓶鼻海豚和长江江豚血清转铁蛋白均具多态性,且两者前5条带分布规律相似,但瓶鼻海豚的每条带的迁移速率都比长江江豚与之对应条带的迁移速率快,表明两者在电荷或分子量上存在差异。瓶鼻海豚的血清转铁蛋白在第Ⅰ和Ⅱ区观察到差异,暂将瓶鼻海豚BE的基因型定为A,表型定为AA,瓶鼻海豚LE的基因型定为B,表型定为BB,则瓶鼻海豚LU的基因型为AB,表型为AB。长江江豚的血清转铁蛋白在第Ⅳ区观察到差异。
瓶鼻海豚LE和LU的血清转铁蛋白的分子量和等电点均检测出两种不同组分。瓶鼻海豚LE的血清转铁蛋白的分子量分别为72,700 Da、69,900 Da,瓶鼻海豚LU的血清转铁蛋白的分子量分别为73,100 Da、69,700 Da。瓶鼻海豚LE的血清转铁蛋白的等电点分别为6.2、6.3。瓶鼻海豚LU的血清转铁蛋白等电点分别为6.3、6.4。瓶鼻海豚的血清转铁蛋白由两种不同分子量的组分组成与骆驼、奶牛、欧洲牛、瘤牛、白臀牛等偶蹄动物相似。瓶鼻海豚血清转铁蛋白与人、兔、大家鼠、豚鼠等陆生哺乳动物相比具有低分子量、高等电点的特性,使其更易于且稳定地结合Fe<3+>。根据PAGE、分子量和等电点的结果推测瓶鼻海豚的血清转铁蛋白可能由6个或6个以上等位基因编码。编码的血清转铁蛋白分子量相差约3,000Da,等电点相差约0.1。