【摘 要】
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目的:通过对使用非洲爪蟾重组cDNA表达文库的血清学分析(Serologial analysis ofrecombinant cDNA expression library,SEREX)技术所筛选出来的76[#]新基因进行全长的分析和克隆
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目的:通过对使用非洲爪蟾重组cDNA表达文库的血清学分析(Serologial analysis ofrecombinant cDNA expression library,SEREX)技术所筛选出来的76[#]新基因进行全长的分析和克隆,然后进行生物信息学分析和原位杂交观察基因的表达情况。最后综合生物信息学分析的结果和基因的表达情况来初步预测该基因的功能。
方法:本研究对使用重组cDNA表达文库的血清学分析(SEREX)技术所筛选出来的76[#]新基因进行全长的分析和克隆,并且进行了内部剪切、核苷酸测序、插入片段的生物信息学分析和基因功能预测。这次试验采用了RT-PCR扩增并克隆新基因的全长,后又运用全胚胎原位杂交技术检测76[#]基因在胚胎发育过程中的表达情况,并结合生物信息学手段对其功能进行了初步的分析和预测。
结果:运用RT-PCR扩增并克隆76[#]新基因的全长并测序,首先通过对开放阅读框(ORF)分析发现有289个碱基,编码82个氨基酸。对完整的ORF进行亚克隆并且进行了全胚胎原位杂交,结果显示在整个胚胎早期发育阶段该基因都有表达,同时发现随着发育的过程,这个新基因主要在头部和背部表达。提示该基因可能与头部和脊柱的早期发育有关。结论:本次研究对(SEREX)技术所筛选出来的76[#]新基因进行全长的分析和克隆,并且进行了一些方面的生物信息学分析和全胚胎原位杂交,并结合起来对其功能进行了初步的分析和预测。
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