论文部分内容阅读
李种植性、适应性极广,已成为助力贵州扶贫攻坚的主要水果产业之一。其中酥李是贵州地方李主栽品种,果实色绿、质脆味甜,深受群众喜爱。随着种植面积不断扩大,李病害的普遍发生和严重危害已制约了李产业的持续发展。但目前有关酥李病害的系统研究较少。本文通过调查李树病害发生情况,针对酥李上三种病害褐腐病、新病害果斑病和叶斑病开展了病原鉴定、生物学特性分析和杀菌剂毒力测定,并对叶斑病和褐腐病开展了田间防控试验和果实安全性评价,以期为酥李病害的绿色防控提供一定的参考。主要研究结果如下:1.李树病害发生调查。贵州李树常见真菌病害有9种,其中褐腐病是影响李果实最严重的病害,多雨季节在各品种上均普遍发生;红点病在脆红李和玫瑰李上发生较为严重,其它品种局部发生;叶斑病主要发生在四月李和蜂糖李叶片上,在脆红李上零星发生;果斑病在四月李和蜂糖李果实上发生为害,表现为畸形、萎蔫、凹陷病变,随后变黑、腐烂;细菌性穿孔病主要发生在枝条和叶片上,部分种植区域发生严重;流胶病、袋果病、病毒病和膏药病田间局部发生,为害较轻,但同样具有较大的危害性。2.三种酥李病害病原鉴定及生物学特性分析。采集三种真菌病害进行了分离纯化、致病性测定、形态学和分子生物学鉴定及系统发育分析,明确了褐腐病病原菌为美澳型褐腐病菌(Monilinia fructicola),新病害果斑病病原菌为藤仓镰刀菌(Fusarium fujikuroi),新病害叶斑病病原菌为互隔交链孢霉(Alternaria alternata)。美澳型褐腐病菌(M.fructicola HF1)生长最适温度为25℃、最适pH为7,以葡萄糖为碳源、蛋白胨为氮源时利用率最高,最适宜菌株生长的光照条件为光暗交替(12:12);新病害果斑病(F.fujikuroi HJGF1)生长最适温度为25℃、最适pH为7,在以葡萄糖和硝酸钠分别为碳源和氮源时利用率最高,最适宜该菌生长的光照条件为全黑(24 h);互隔交链孢霉(A.alternata HJHB1022)生长最适温度为25℃、最适pH为7,在以麦芽糖为碳源、蛋白胨为氮源时利用率最高,不同光照处理对该病原菌菌丝生长的影响差异不显著。3.采用菌丝生长速率法分别测定了杀菌剂对三种病原菌的室内毒力。对F.fujikuroi HJGF1菌丝生长具有较强抑制作用的药剂有丁香酚、吡噻菌胺、丙硫菌唑、嘧菌酯和嘧菌环胺,其EC50依次为2.1821 mg/L、4.1074 mg/L、4.8704 mg/L、5.2313 mg/L和6.2818 mg/L。对A.alternata HJHB1022菌丝生长具有较强抑制作用的药剂有丁香酚和吡噻菌胺,其EC50分别为0.8642 mg/L和4.4939 mg/L。另外,丁香酚、丙硫菌唑、吡噻菌胺、小蘖碱、嘧菌环胺、腈苯唑和嘧菌酯对M.fructicola HF1菌丝生长均具有较强抑制作用,其EC50分别为0.1295 mg/L、0.3015mg/L、1.0395 mg/L、1.8581 mg/L、2.2315 mg/L、4.4026 mg/L和5.0843 mg/L;同时筛选出2种对该菌具有增效作用的配方组合,分别为丙硫菌唑与嘧菌酯、吡噻菌胺与嘧菌酯,配方均比为1:1,其EC50分别为0.1140 mg/L和1.1347 mg/L。4.不同杀菌剂防治叶斑病和褐腐病田间药效试验。根据室内毒力进一步开展田间药效试验,结果表明:5种药剂中20%吡噻菌胺悬浮剂2000倍液和50%嘧菌环胺水分散粒剂800倍喷雾处理对蜂糖李叶斑病的防效较好,分别达75.11%和73.67%,与其他药剂防效差异明显;其次为25%嘧菌酯悬浮剂2000倍液处理。增效组合丙硫菌唑:嘧菌酯(1:1)悬浮剂2000倍液和吡噻菌胺:嘧菌酯(1:1)悬浮剂2000倍液喷雾处理对脆红李褐腐病的防效较好,施药2次后防效分别达81.01%和79.33%,明显高于单剂处理;而单剂中,以30%丙硫菌唑可分散油悬浮剂2000倍液和20%吡噻菌胺悬浮剂2000倍液的防效较好,生产中可轮换使用。选取防效较好的4种药剂处理进一步测定果实品质,与对照相比,施药处理明显改善了脆红李果实外观和内在品质,尤其以丙硫菌唑:嘧菌酯(1:1)悬浮剂处理效果较佳。5.建立了HPLC-MS/MS检测李果实和土壤中嘧菌酯残留的分析方法。在0.05~2.00μg/mL,嘧菌酯的进样质量浓度与峰面积之间呈现较好的线性关系,标准曲线为y=38621x+874.85,相关系数为0.9969,嘧菌酯的保留时间为0.842 min;当标样添加量为0.1~5 mg/kg时,嘧菌酯在李果实和土壤中的添加回收率分别为83.41%~97.22%和85.89%~92.64%,相对标准偏差分别为2.35~3.02和2.01~5.62;田间药效试验中,在李子采收期取样检测,李果实和土壤中的残留量分别是0.0601 mg/kg和0.0989 mg/kg,均未超过我国在李上的最高残留限量值2 mg/kg。