山羊痘病毒ORF31、ORF117、ORF72基因的原核表达及磷酸酶活力分析

来源 :宁夏大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mini8912
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为了研究羊痘病毒蛋白的功能,本实验将山羊痘病毒的DNA结合核衣壳蛋白(ORF31)、融合蛋白(ORF117)、蛋白磷酸酶(ORF72)3个编码基因,分别克隆至pET-30a(+)原核表达载体后转化入大肠杆菌细胞。重组表达菌经IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳,结果显示3个重组蛋白均在原核细胞中获得表达,且大部分以包涵体形式存在,ORF72的蛋白的表达产物有少量可溶性蛋白。表达产物经镍柱纯化进行western blotting分析,ORF72蛋白能与山羊痘阳性血清反应,证明ORF72蛋白具有免疫反应原性,另外两种蛋白则无反应原性。对磷酸酶活力鉴定试验结果表明,其能够水解对硝基苯磷酸二钠(PNPP),最适pH值为6.0;酶促反应的最适温度均为40℃。磷酸酶抑制剂能够抑制其磷酸酶活性,Cd2+、Cr3+重金属离子的盐溶液对酶无抑制作用,Zn2+、Mg2+金属离子的盐溶液对酶抑制作用较弱,金属离子Ag+、Hg2+、Pb2+的盐溶液对该酶有较强的抑制作用。本研究为山羊痘病毒蛋白功能的鉴定、诊断抗原的筛选提供了理论依据;同时是国内外首次确定山羊痘病毒ORF72基因编码蛋白为蛋白磷酸酶,并对表达产物的酶活力进行分析。
其他文献
一、什么是抗虫棉? 棉花害虫很多,因虫害而造成的损失很大,棉农为治虫而投入的资金和劳动量,是其他种植业所无法相比的,因此培育抗虫的棉 First, what is insect-resistant
摘 要: 导课与结课之间应该注意起承转合,首尾呼应,这样一堂课才成为一个完整的乐章,才能使整个教学环节丝丝入扣,浑然一体。概括地说有回环式、递进式和延伸式三种,三者之间不是截然分开的,而是互相渗透、融会贯通的,应根据实际情况而定。教师在设计导课与结课时必须有意识地使二者遥相呼应,使教学达到浑然一体的境界。  关键词: 导课 结课 呼应  新颖别致的导课,能使学生在短时间内以最佳的心理状态进入角色,
情感是现代散文的灵魂。学习《现代散文选读》时,教师应引领学生感受现代散文的情感,突出学生的情感体验,以情感引领课堂,引领学生的写作,培养学生的情感素养。 Emotion is
早熟高产面包用小麦──“轮综51”和“轮综52”中国农业科学院作物育种栽培研究所邓景扬和黄泳沂研究员,首次成功地利用太各显性雄性核不育基因经轮回选择培育出的早熟、高产、优
摘 要: 语文学科主要以文字语言为基础,阅读教学是语文教学的重要组成部分。为了增强教学效果,调动学生阅读积极性和主动性是非常必要的,因为语文阅读教学是教师、学生与文本之间相互交流的过程,三者缺一不可。作者基于多年教学经验,对语文阅读教学中的交流与互动方法和策略进行深入分析和研究。  关键词: 语文阅读 交流 互动  随着教育体制改革,教学模式不断创新,教学过程中越来越注重发挥学生的主观能动性。学生
摘 要: 语文学业不良的高中学生是客观存在的,这是每位高中老师都必须面对的并重点解决的问题。在新课程改革下,学校方面应该做好提高学生整体素质的工作,教师应该做好语文学业不良学生的转化工作。本文主要分析了学业不良学生的特点、形成原因,并对如何转化学业不良学生等方面进行论述。  关键词: 高中语文 学业不良 转化对策  高中阶段,学生之间的成绩差距越来越明显,部分学生的语文学习状态越来越好,学习高效轻
<正> 《飞影阁画报》《飞影阁画册》《飞影阁画报册》《飞影阁画报》是吴友如以“飞影阁主”的名义,在光绪十六年九月初三(1890年10月16日)创办的。那时申报馆附设的点石斋所出的《画报》已出版了6年有余,累达240余期了。吴友如曾是《画报》的主持人(点石斋所出版的《画
摘 要: 培养学生文学兴趣是学生鉴赏文学作品的基础,在汉语文教学中,教师应该注重培养学生的阅读兴趣和课外阅读能力,通过阅读文学作品提高学生的写作水平能力和语感,使学生提高语言组织和思维表达能力,广泛认知文学的重要性。  关键词: 中学文学 激发兴趣 培养能力  爱因斯坦曾说:“兴趣是最好的老师。”兴趣是人类探索某种事物或从事某种活动所表现出来的特殊积极的个性倾向。它是调动学生学习积极性的一种力量,
油菜连作,一是菌核病易逐年加重而导致减产;二是土壤内钾与硼易缺乏而导致减产。而我站每年冬季办油菜丰产样板,都是在杂交水稻田连年连作油菜的,由于着重抓如下五条,都取得
摘 要: 目前课堂教学中一些教师讲得很多,有的甚至“满堂灌”、“填鸭式”。有的教师在课堂教学中为了让学生参与到课堂教学中,达到多练的目的,就出现了该讲的没有讲,该挖掘的没有挖掘的问题,缺少了知识含量,缺少了厚度与深度。内容精讲要做到通过预习能学会的不讲,一学就会的不讲,讲了也不会的不讲。对于一些关键性的问题、概念,教师不仅要讲,还要讲深讲透,绝不能不开金口,不能一味追求少讲。作者对“精讲”谈谈观点