【摘 要】
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沙门氏菌(Salmonella)是一种重要的食源性致病菌,每年由它引起的食物中毒事件在全球范围内长居首位。近年来,在不断增长的抗生素选择性压力下,耐药性沙门氏菌血清型的数量及耐受的抗生素种类都不断增加,沙门氏菌的耐药性问题得到人们的广泛关注,已经成为科学研究的热点。本研究选取了2006年到2013年间在宁波地区分离获得的121株沙门氏菌,利用血清分子分型靶点S9和S69对其中未知血清型进行鉴定,再
【基金项目】
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国家自然基金青年基金项目(No.31601562); 国家自然科学基金面上项目(No.31471660);
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沙门氏菌(Salmonella)是一种重要的食源性致病菌,每年由它引起的食物中毒事件在全球范围内长居首位。近年来,在不断增长的抗生素选择性压力下,耐药性沙门氏菌血清型的数量及耐受的抗生素种类都不断增加,沙门氏菌的耐药性问题得到人们的广泛关注,已经成为科学研究的热点。本研究选取了2006年到2013年间在宁波地区分离获得的121株沙门氏菌,利用血清分子分型靶点S9和S69对其中未知血清型进行鉴定,再用传统玻片凝集法验证,将这121株沙门氏菌共分为27种血清型。对这些分离株进行耐药谱的检测,利用PCR方法对筛选到的耐药菌株的相关耐药基因及毒力基因进行筛查。结果显示:分离株对12种常见抗生素的耐药率依次是:氨苄西林,19.8%;四环素,13.2%;强力霉素,12.4%;复方新诺明,11.6%;氯霉素,8.7%;链霉素,6.6%;妥布霉素,3.3%;头孢曲松,2.5%;环丙沙星,0.8%;对诺氟沙星、庆大霉素、阿米卡星敏感。在24株β-内酰胺类抗生素耐受菌株中,全部携带耐药基因blaTEM(100%),部分携带基因blaPSE(29.2%)、blaCMY-2(4.2%)、blaCTX(8.3%),缺少基因blaSHV(0%)。18株四环素类抗生素耐受菌株中,全部携带耐药基因tet A(100%)、tet B(100%),部分携带基因tet G(70.8%)、tet C(20.8%)。15株磺胺类抗生素耐受菌株中,全部携带耐药基因sul I(100%)和sul II(100%),部分携带基因sul III(80%)。32株分离株毒力基因携带率普遍较高,其中毒力基因avr A、ssa Q、gip A、sod C1、mgt C的携带率均达到100%,其他毒力基因的携带率分别为sop E(96.9%)、ssi D(93.8%)、spo B(93.8%),spv C(21.9%)。上述结果显示:宁波地区沙门氏菌耐药情况比较严重,耐药基因与毒力基因携带率较高,本研究为宁波地区沙门氏菌疫情的防控提供了一定的数据支持。头孢曲松是治疗沙门氏菌感染的常用药物,临床上的广泛使用使得该抗生素在环境和人体中的残留浓度不断增加,对沙门氏菌的耐药性形成具有促进作用。本文利用亚抑菌浓度的头孢曲松对沙门氏菌标准菌株及筛选出的对头孢曲松敏感的多重耐药菌株进行诱导,诱导菌株后,对其抗生素敏感性进行监测。结果显示:标准菌株ATCC 13076经诱导后,对十二种抗生素敏感性均不变;耐药菌株SJTUF 11153与SJTUF 11152经诱导后虽对抗生素敏感性发生变化,但是,经传代后恢复为原来的耐药表型。耐药菌株SJTUF 11202经诱导后耐药表型发生变化且传代两周后多数耐药表型未恢复为原来的耐药状态。利用RT-q PCR技术来检测菌株SJTUF 11202相关耐药基因tet A、tet C、tet G、tol C、acr A、acr B、omp D在菌株诱导前后的表达差异。结果显示:细菌的tet C、tet G基因在荧光定量PCR检测时无信号表达;与诱导前相比,四环素相关耐药基因tet A与外膜蛋白基因omp C的表达量都分别下调了3.8和3.5倍,acv A的表达量无明显变化(1.48),acr B、tol C的表达量分别上调了2.8和2.4倍。结果说明,亚抑菌浓度头孢曲松会影响多重耐药沙门氏菌相关耐药基因的表达,从而影响细菌的耐药性,这提示我们在沙门氏菌病治疗时应合理适量应用抗生素,以防控由此导致的沙门氏菌耐药性发展。
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