目的:长期以来,脂肪组织一直被认为是能量贮备的终末分化器官。而随着众多脂肪细胞因子相继发现,脂肪组织旺盛的内分泌功能逐渐为人们所认识,脂肪组织作为一个内分泌器官已成为学术界的共识。脂肪细胞因子在调节整个机体的能量代谢平衡上发挥重要的作用,分泌失调将引起多种代谢紊乱,与胰岛素抵抗( insulin resistance, IR)、肥胖、糖尿病、冠心病、高脂血症等密切相关,被视为IR和心血管疾病可能的中间环节。内脂素(visfatin)作为一种新发现的脂肪细胞因子,其主要来源于内脏脂肪组织,具有拟胰岛素活性,可降低血糖并能促进脂肪的合成与聚集。除与肥胖、胰岛素抵抗等代谢紊乱相关,内脂素还具有其它多种生物学功能,可能与易损斑块、血管增生、内皮功能紊乱、炎症等密切相关,参与了冠心病的病理生理过程,已成为近年来研究的热点。内脂素发挥拟胰岛素的降低血糖作用,因它可与胰岛素受体上的非胰岛素的结合位点相结合,激活胰岛素信号转导通路,促进肌肉与脂肪细胞对葡萄糖的摄取,同时抑制肝葡萄糖输出。胰岛素抵抗是2型糖尿病重要的发病机制之一,内脂素与2型糖尿病相关性的临床研究越来越深入。国外学者研究发现,2型糖尿病患者血浆内脂素浓度较非糖尿病患者增加[15]。有研究发现,在体外培养的3T3-L1脂肪细胞中,地塞米松能上调内脂素mRNA的表达,而生长激素、TNF-α、异丙肾上腺素则不同程度的抑制其表达,且呈明显的时间和剂量依赖性。胰岛素抵抗导致的激素水平的改变能调节内脂素mRNA的表达,提示内脂素可能是肥胖和胰岛素抵抗的联系纽带。有学者通过对正常人群实行葡萄糖钳夹试验证实,短时间(4 h)葡萄糖浓度增加,可使机体血循环中内脂素表达水平代偿性升高,而外源性胰岛素或生长抑素的输注可以阻断高糖对内脂素的诱导效应[18]。目前,关于内脂素的研究多集中在脂肪细胞中。经研究发现,内脂素在骨骼肌、骨髓基质细胞、肝脏中均有表达。而心肌细胞是否表达内脂素,高血糖刺激对心肌细胞内脂素表达起了什么作用尚无相关报道。本研究通过观察不同浓度的葡萄糖对体外培养的新生大鼠心肌细胞内脂素表达的影响,探讨内脂素在糖尿病发病过程中的作用,为临床糖尿病合并心血管疾病的诊治提供新的思路。方法:无菌试验条件下不分性别的提取新生2-3天的Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌细胞进行原代培养,48小时含血清培养,24小时撤血清培养之后,选取生长状态好的细胞随机分为11组。葡萄糖六组:①低糖对照组(5.5mmol/L)、②高糖25mmol/L组、③高糖30mmol/L组、④高糖50mmol/L组、⑤高糖80mmol/L组、⑥高渗对照组。不同作用时间五组①6h组、②12h组、③24h组、④48h组、⑤对照组。以不同浓度的葡萄糖干预48小时及高糖(50mmol/L)作用不同时间后,以GAPDH为内对照,应用RT-PCR和western-blot技术检测心肌细胞中内脂素mRNA和蛋白的表达水平。结果:(1)随葡萄糖浓度增加,大鼠心肌细胞内脂素mRNA及蛋白的表达明显增加,且高糖对于心肌细胞内脂素表达的影响是由于葡糖糖浓度,而非由渗透压所造成。(2)心肌细胞在高糖作用24h内,内脂素mRNA及蛋白的表达随作用时间的延长而明显增加;作用超过24h,内脂素mRNA及蛋白的表达相对于作用24h时无显著变化。结论:心肌细胞可以表达内脂素。高浓度的葡萄糖可促进体外培养的心肌细胞内脂素的表达水平的增加。随着葡萄糖浓度的升高,心肌细胞内脂素的表达水平亦逐渐增加。高糖对于心肌细胞内脂素表达的影响是由于葡萄糖浓度,而非渗透压造成。在高糖作用24h内,心肌细胞内脂素的表达水平随时间的延长而明显增加。