【摘 要】
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研究了艰难梭菌A毒素(Clostridium difficile toxin A,TcdA)诱导人黏液表皮样癌细胞(MEC-1)DNA双链损伤的机制.采用MTT法、中性彗星电泳法与免疫荧光法三联实验,分别检测TcdA对MEC-1细胞增殖抑制的影响、TcdA对MEC-1细胞造成DNA双链损伤程度以及TcdA引起MEC-1细胞DNA双链断裂相关蛋白γH2AX、pATM表达的影响.结果表明:TcdA(50～800 μmol·L-1)抑制了 MEC-1细胞的生长且存在时间和浓度依赖特点;TcdA作用MEC-1细胞
【机 构】
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西北民族大学 医学部,甘肃兰州 730030
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研究了艰难梭菌A毒素(Clostridium difficile toxin A,TcdA)诱导人黏液表皮样癌细胞(MEC-1)DNA双链损伤的机制.采用MTT法、中性彗星电泳法与免疫荧光法三联实验,分别检测TcdA对MEC-1细胞增殖抑制的影响、TcdA对MEC-1细胞造成DNA双链损伤程度以及TcdA引起MEC-1细胞DNA双链断裂相关蛋白γH2AX、pATM表达的影响.结果表明:TcdA(50～800 μmol·L-1)抑制了 MEC-1细胞的生长且存在时间和浓度依赖特点;TcdA作用MEC-1细胞24 h、100～400 μmol·L-1浓度曲线组和TcdA浓度为800 μmol·L-1、作用MEC-1细胞3～24 h时间曲线组,MEC-1彗星细胞的尾长、尾部DNA、尾矩和Olive尾矩呈增加趋势,头部DNA百分比减少,800 μmol·L-1 TcdA作用MEC-1细胞24 h,上述参数均有统计学意义;100～800μmol·L-1 TcdA作用MEC-1细胞24 h浓度曲线组和TcdA浓度为800 μmol·L-1、作用MEC-1细胞3～48 h时间曲线组、γH2AX、pATM阳性细胞率基本呈增加趋势.艰难梭菌A毒素杀伤肿瘤细胞的机制是诱导肿瘤细胞的DNA双链断裂损伤,其可能与抑制MEC-1细胞增殖,影响细胞γH2AX、pATM的表达水平有关.
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