【摘 要】
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目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)法测定文多灵在大鼠肝微粒体中的代谢物及参与体外代谢的CYP450酶.方法 大鼠肝微粒体样品采用乙酸乙酯萃取,色谱柱为Acquit
【机 构】
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河北医科大学第二医院 药学部,河北 石家庄 050017;河北医科大学药学院 药物分析教研室,河北 石家庄 050017
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目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)法测定文多灵在大鼠肝微粒体中的代谢物及参与体外代谢的CYP450酶.方法 大鼠肝微粒体样品采用乙酸乙酯萃取,色谱柱为Acquity UPLC@BEH C18(2.1×100 mm,1.7μm),柱温:40℃,流动相为3 mmol·L-1乙酸铵缓冲溶液-乙腈进行梯度洗脱,流速为0.3 mL·min-1,质谱采用电喷雾离子源,正离子检测方式,来鉴定在大鼠肝微粒体中文多灵的代谢产物.并利用 α-萘黄酮,盐酸苯海拉明,磺胺苯吡唑,奎那定,二乙基二硫代氨基甲酸胺和酮康唑分别作为CYP1A2,CYP2B,CYP2C11,CYP2D1,CYP2E1,CYP3A的特异性抑制剂,确定介导文多灵代谢的CYP450酶亚型.结果 文多灵在CYP450孵育体系中共检测22个新增产物峰其中发现5种新的体外代谢产物;CYP1A2,CYP2B,CYP2C11,CYP2D1,CYP2E1分别参与了17,7,6,8,3种文多灵的体外代谢产物的生成,而CYP3A参与了所有代谢产物的生成.结论 该方法快速,灵敏,准确的鉴定大鼠体内文多灵的代谢产物,同时确定了参与文多灵代谢的酶亚型.
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