【摘 要】
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制备抗PbPH单克隆抗体(mAb),检测伯氏疟原虫(Plasmodium berghei)PbPH的表达特点和传播阻断能力.主要通过蛋白免疫印迹(Western blot,WB)和间接免疫荧光法(Indirect immunofl
【机 构】
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中国医科大学基础医学院 病原生物学教研室,辽宁 沈阳 110021;中国医科大学基础医学院 免疫学教研室,辽宁 沈阳 110021
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制备抗PbPH单克隆抗体(mAb),检测伯氏疟原虫(Plasmodium berghei)PbPH的表达特点和传播阻断能力.主要通过蛋白免疫印迹(Western blot,WB)和间接免疫荧光法(Indirect immunofluoscent assay,IFA),确定PbPH的表达阶段以及抗PbPH单克隆抗体的特异性.1×106个P.berghei感染雌性BALB/c小鼠3 d后,尾静脉收集感染小鼠的血液,与鼠源的抗PbPH单克隆抗体/PBS对照,按照不同的稀释倍数(1︰5、1︰10、1︰50)进行混合培养,观察15 min后疟原虫配子体出丝中心数及24 h后动合子形成数的变化.WB和IFA检测抗PbPH单克隆抗体可以识别雌雄配子体、雄配子、雌配子/合子、retort和动合子的表面抗原.体外传播阻断实验中,与PBS对照组相比,在加入不同浓度(1︰5、1︰10)的抗PbPH单克隆抗体培养后,配子体出丝中心数分别减少了41.7％、32.7％,差异具有统计学意义(P<0.05);动合子形成数分别减少了45.1％、14.8％,差异具有统计学意义(P<0.05).抗PbPH单克隆抗体可以有效阻断体外配子体出丝中心和动合子的形成,从而影响伯氏疟原虫在蚊体内的进一步发育和继续传播.
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