人铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆和在乳酸乳球菌中的表达

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kingwangcheng

【摘要】

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采用RT-PCR技术从人肝总RNA中分离扩增了0.45kb的人铜锌超氧化物歧化酶(Cu/zn SOD)基因的cDNA序列,首先克隆至大肠杆菌表达质粒pET23b,进行了序列测定和超高表达.将Cu/zn SOD

【作者】

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向华卫文仲谭华荣郭顺星

【机构】

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中国科学院微生物研究所,北京,100080中国医学科学院药用植物研究所,北京,100094;

【出处】

：

生物工程学报

【发表日期】

：

2000年1期

【关键词】

：

超氧化物歧化酶基因克隆与表达乳酸乳球菌

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采用RT-PCR技术从人肝总RNA中分离扩增了0.45kb的人铜锌超氧化物歧化酶(Cu/zn SOD)基因的cDNA序列,首先克隆至大肠杆菌表达质粒pET23b,进行了序列测定和超高表达.将Cu/zn SOD cDNA亚克隆至乳酸乳球菌表达载体pMG36e,用电穿孔法将重组质粒pMG36esod转化到乳酸乳球菌中,获得Cu/zn SOD的组成型表达,其表达量约占乳酸乳球菌可溶性蛋白的5%以上,活性染色表明该工程菌表达的Cu/zn SOD具有较好的酶活性.

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