【摘 要】
：
血管钙化是慢性肾脏病患者心血管疾病死亡的主要危险因素。随着疾病的进展,慢性肾脏病患者将长期处于钙磷代谢失衡、微炎症及氧化应激等微环境紊乱状态,体内多种因素相互交叉作用促进血管钙化的发生与发展。目前多项研究显示,miRNAs参与了多种调控血管平滑肌细胞钙化的细胞内途径。其中,Runx2靶向的miRNAs差异性地调节血管平滑肌细胞中Runx2蛋白的表达,进而影响平滑肌细胞的钙化,在慢性肾脏病血管钙化的
论文部分内容阅读
血管钙化是慢性肾脏病患者心血管疾病死亡的主要危险因素。随着疾病的进展,慢性肾脏病患者将长期处于钙磷代谢失衡、微炎症及氧化应激等微环境紊乱状态,体内多种因素相互交叉作用促进血管钙化的发生与发展。目前多项研究显示,miRNAs参与了多种调控血管平滑肌细胞钙化的细胞内途径。其中,Runx2靶向的miRNAs差异性地调节血管平滑肌细胞中Runx2蛋白的表达,进而影响平滑肌细胞的钙化,在慢性肾脏病血管钙化的机制研究中具有重要作用。目前,miRNAs与慢性肾脏病血管钙化的基础研究,提供了大量的理论支持,然而循环血清miRNAs与慢性肾脏病血管钙化的关系还有待证实。第一部分miR-129在高磷诱导的血管平滑肌细胞钙化中的机制研究目的:探讨高磷环境下,miR-129在大鼠血管平滑肌细胞钙化中的作用机制。方法:使用高磷培养基（含10mmol/lβ-甘油磷酸二钠盐）诱导大鼠主动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）钙化。将高磷培基培养的大鼠VSMCs作为高磷组,正常DMEM培基培养的大鼠VSMCs作为正常组。采用Western Blot检测VSMCs内Runx2、a-SMA、SM-22a蛋白的表达。茜素红染色及钙含量测定评估VSMCs的钙化情况,碱性磷酸酶试剂盒检测碱性磷酸酶的活性,qRT-PCR检测VSMCs内miR-129的相对表达量。通过转染miR-129 mimic、miR-129 inhibitor,调节VSMCs内miR-129的表达,测定各组VSMCs钙化情况、ALP活性、Runx2、a-SMA及SM-22a蛋白的表达的变化。通过双荧光素酶报告基因实验,验证miR-129与Runx2的靶向关系。P＜0.05,认为差异有统计学意义。结果:与正常组相比,高磷组VSMCs矿化结节量及钙含量明显增加,成骨细胞标志物ALP的活性及Runx2蛋白的表达水平显著升高,a-SMA蛋白、SM-22a蛋白表达明显下降,且miR-129的表达水平显著降低,差异有统计学意义。高磷组细胞转染miR-129 mimic后,与高磷未转染组（HP）和高磷+miRNA空载对照组（HP+miR-C）细胞相比,miR-129的表达水平明显增高,细胞内矿化结节量及钙含量明显降低,Runx2蛋白及ALP活性明显下降,a-SMA蛋白、SM-22a蛋白明显增高,证明过表达miR-129抑制VSMCs的钙化。此外,抑制miR-129的表达,结果与之相反。双荧光素酶报告基因结果显示:miR-129与Runx2特异性结合,并在转录后水平下调Runx2的表达。结论:体外构建高磷诱导的VSMCs钙化模型证明:miR-129靶向Runx2,负性调控Runx2的表达,抑制VSMCs的钙化。miR-129是VSMCs血管钙化的关键负调控因子。第二部分循环血清miR-129在慢性肾脏病血管钙化中的诊断价值目的:观察慢性肾脏病血管钙化患者血清miRNA-129表达水平的变化,探讨miRNA-129在慢性肾脏病血管钙化中的诊断价值。方法:（1）选取2020年6月至2021年1月就诊于河北医科大学第四医院肾内科的慢性肾脏病患者,根据agatston钙化积分,将患者分为无钙化组、轻中度钙化组、重度钙化组。（2）采用定量PCR探针法检测miR-129的表达、实时荧光定量PCR检测Runx2的表达水平。（3）采用卡方检验（分类资料）、方差分析（正态分布的计量资料）或K-W H秩和检验（非正态分布的计量资料）分析三组患者的临床基本特征。Spearman相关分析法及多元有序Logistic回归,分析CKD血管钙化的相关危险因素。ROC曲线分析评估miR-129在CKD患者血管钙化中的诊断价值。P＜0.05,认为差异有统计学意义。结果:本研究共纳入76名慢性肾脏病患者,其中无钙化组25人、轻中度钙化组27人和重度钙化组24人。与无钙化组相比,轻中度钙化组及重度钙化组miR-129的表达水平明显降低（P＜0.0001）,而Runx2的表达水平明显升高（P＜0.0001）。Spearman相关分析提示血清miR-129与血管钙化呈负相关（r=-0.81,P＜0.0001）,Runx2与血管钙化呈正相关（r=0.56,P＜0.0001）,且血清miR-129与Runx2成负相关（r=-0.52,P＜0.0001）。多元有序logistic回归提示miR-129的低表达是血管钙化的独立危险因素（OR=0.017,P=0.002）。ROC曲线分析结果提示单一miR-129预测慢性肾脏病血管钙化的发生AUC值0.937（P＜0.05）。结论:单一miR-129的低表达,能较好的预测慢性肾脏病血管钙化的发生,其有望成为早期诊断血管钙化的潜在生物学标志物。
其他文献
目的:原发性睾丸淋巴瘤（PTL）是一种少见的侵袭性结外非霍奇金淋巴瘤,其发病机制尚不明确,预后很差。本研究旨在探讨PTL的临床特点及影响其预后的相关因素。方法:回顾性分析2009年1月至2021年12月河北医科大学第四医院收治的临床及随访资料完整的63例PTL患者相关资料。单因素分析采用Kaplan-Meier法,并用Log-Rank进行检验。采用Cox比例风险回归模型进行多因素分析,以评价PTL
目的:对直肠神经内分泌肿瘤患者的临床病理资料进行分析,并探讨其在不同级别肿瘤间差异及与淋巴结转移、预后的关系。旨在为临床直肠神经内分泌肿瘤患者的诊治提供一定的帮助。方法:收集2007年1月至2021年12月共15年间就诊于河北医科大学第四医院的228例直肠神经内分泌肿瘤患者的临床病理资料,主要包括患者的临床表现、病理结果、治疗方法等,并通过电话、信件等方式对患者进行随访,统计其术后有无复发或远处转
目的:比较普通白光内镜、白光内镜联合窄带成像内镜技术（Narrow band imaging,NBI）及/或胃蛋白酶原（Pepsinogen,PG）检测对早期胃癌及癌前病变的诊断价值。分析NBI联合PG检测对早期胃癌及癌前病变的诊断效能。方法:选取2018年1月1日至2020年12月31日就诊于河北医科大学第四医院行内镜检查,同时行或未行PG检测者为研究对象。以病理组织学结果作为诊断胃癌及癌前病变
慢性肾脏病（CKD）的患病率与死亡率在国内外逐年上升,已成为一个世界性的常见慢性疾病,严重威胁着人们的健康。心血管疾病（CVD）是CKD、终末期肾脏病（ESRD）患者最常见的并发症及最主要的死亡原因,而血管钙化（VC）是CVD和心血管死亡的独立危险因素之一。在高磷等因素作用下,VSMCs发生成骨样表型转化,平滑肌细胞特异性的生物标志物表达减少,而成骨细胞生物标志物的表达明显增加,最终发生血管钙化。
背景与目的:肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma,HCC）是世界上最常见的恶性肿瘤之一,其死亡率逐年上升。尽管在过去几十年中已经开发出各种治疗方法,但是晚期肝细胞癌患者的预后仍然很差。近期,肿瘤免疫疗法为抑制肿瘤进展、复发和转移开辟了新的路径,免疫检查点抑制剂CTLA-4抑制剂和PD-1/PD-L1抑制剂已被广泛地应用于临床。而T细胞免疫球蛋白及粘蛋白分子3（Tim-3）是一
目的:通过观察真实世界中应用程序性细胞死亡蛋白1（programmed cell death protein 1,PD-1）抗体联合化疗和/或血管靶向药物治疗晚期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者的疗效及免疫相关不良反应（immune-related adverse events,irAEs）,并初步探索irAEs的发生与临床检验和影像检查结果的相
目的:本研究收集了2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）合并下肢动脉疾病（lower-extremity arterial disease,LEAD）且成功行下肢动脉介入术患者的血清,通过检测利拉鲁肽干预后血清中的内脏脂肪型丝氨酸蛋白酶抑制剂（visceral adipose tissue-derivedserine protease inhibitor,Vasp
目的:黑色素瘤（Skin cutaneous melanoma,SKCM）起源于黑素细胞的恶性转化,可发生于眼、胃肠道、外生殖器、鼻窦和脑脊膜,但最常累及皮肤紫外线损伤部位。近年来,我国黑色素瘤发病率和死亡率呈现上升趋势,根据中国国家癌症中心数据显示,2016年我国黑色素瘤年龄标准化发病率和死亡率分别为0.32/100000和0.17/100000。早期黑色素瘤通过外科治疗能够达到治愈,而转移性黑
目的:本文探索免疫检查点抑制剂程序性细胞死亡蛋白1（programmed cell death protein 1,PD-1）/程序性细胞死亡配体1（programmed cell death-ligand 1,PD-L1）抗体治疗驱动基因突变阴性晚期非鳞非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）在真实世界临床应用中的疗效及药物的安全性,旨在为进一步优化晚期N
目的:本研究回顾性分析了河北医科大学第四医院内镜科行内镜黏膜下剥离术（endoscopic submucosal dissection,ESD）治疗早期胃癌及癌前病变的资料,旨在为临床早期胃癌患者的管理提供依据。方法:将2015年9月至2021年9月间河北医科大学第四医院本部内镜科因早期胃癌及癌前病变行ESD术的患者纳入研究,通过电子病历系统及内镜图文数据库系统收集相关资料,包括术前内镜评估资料、