烟曲霉单克隆抗体的制备与鉴定以及烟曲霉GM抗原捕获方法的建立

来源 :第一军医大学 南方医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jxy_su261314
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近年来,由于各种医源性因素如广谱抗生素、皮质类固醇激素、免疫抑制剂以及抗肿瘤药物等的广泛使用,器官移植及各种导管介入手术的开展,导致机会性深部真菌感染的发病率明显增高。曲霉菌跃居第二已成为仅次于念珠菌的重要致病性真菌,由曲霉感染引起的侵袭性曲霉病(IA),严重威胁患者的生命,死亡率高达80%甚至到100%,其中烟曲霉感染引起的IA占总IA的90%以上。临床研究表明,IA的早期诊断与预后关系密切。但由于曲霉感染发病隐匿,临床表现缺乏特征性,早期诊断十分困难。血培养、组织活检为曲霉感染实验室诊断的金标准,但培养时间长、阳性率低、操作污染导致的假阳性及组织活检的局限性和创伤性,已不能满足临床的需要。目前,血清学和分子生物学研究已成为人们的关注点,PCR技术在早期感染即可检测到微量的真菌DNA,且可以鉴定到种,对指导临床用药有一定帮助。但在引物设计、临床标本的防污染处理,结果的判断等对实验室和操作人员的要求很高,国内外仍停留在小样本的研究。而血清抗体的检测受限于患者本身在严重免疫抑制状态下,无法产生足够的抗体。而且由于烟曲霉孢子漂浮于空气中,几乎每个健康成人血清中均存在烟曲霉抗体。因此,抗体不能用于早期、特异性的检测。真菌抗原的检测也是目前研究的热点。研究显示,从烟曲霉的提取物中目前至少发现100多种抗原性分子,约有12种被纯化成单一抗原形式。已经证实烟曲霉细胞壁上丰富的半乳糖甘露聚糖(galactomannan GM)是烟曲霉的主要抗原成分,
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