【摘 要】
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背景及目的:手足口病（Hand,foot and mouth disease,HFMD）的病原体为小RNA病毒科,肠道病毒属,其中以柯萨奇病毒A组16型病毒（Coxsackievirus A16,CV-A16）和肠道病毒71型（Enterovirus A71,EVA71）最为常见。HFMD是一种自限性的疾病,多数患儿可以自愈,但也有少部分患儿病情危重,甚至死亡。而转重症的患儿多为EV-A71感染。
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背景及目的:手足口病（Hand,foot and mouth disease,HFMD）的病原体为小RNA病毒科,肠道病毒属,其中以柯萨奇病毒A组16型病毒（Coxsackievirus A16,CV-A16）和肠道病毒71型（Enterovirus A71,EVA71）最为常见。HFMD是一种自限性的疾病,多数患儿可以自愈,但也有少部分患儿病情危重,甚至死亡。而转重症的患儿多为EV-A71感染。目前认为,细胞凋亡是其病情加重的重要原因之一,但目前对HFMD中凋亡现象的研究较少。该实验目的为进一步研究HFMD中各凋亡途径在不同器官中的作用。方法:我们获取了7例因EV-A71感染致重症HFMD而死亡患儿的心、肝、脑、肺、肾以及肠组织。先对各组织进行HE染色,以确定该组织的损伤情况。接下来对组织进行凋亡因子Fas,Bax,半胱天冬酶3（Caspase3）,肿瘤坏死因子受体2（Tumor necrosis factor receptor 2,TNFR2）和细胞色素C（Cytochrome C）的免疫组化染色,对每张切片进行凋亡表达评分。由于Caspase 3是细胞凋亡最后的执行者,以Caspase 3的表达程度代表各个组织凋亡程度,探究重症HFMD中各器官的凋亡程度差异;以Cytochrome C代表线粒体凋亡途径,以Fas和TNFR2分别代表外源性死亡受体Fas途径以及TNF-α与TNFR2结合诱导的凋亡途径,探讨各凋亡途径在不同组织间发挥作用的差异;由于Bax使线粒体外膜透化（Mitochondrial outer membrane permeabilization,MOMP）后,Cytochrome C从线粒体中漏出至细胞质,将Bax和Cytochrome C的表达程度进行比较,探究MOMP是否主要由Bax导致。结果:HE染色提示损伤较重的组织有肺,脑,肠;而心脏,肝,肾损伤较小。免疫组化染色提示在所有6种组织中都检测到了5种凋亡因子的表达。（1）同一凋亡因子在不同组织间表达的对比:Caspase 3在肠和肾的表达程度明显强于心脏,说明肠和肾组织发生的凋亡事件比心脏多,而其余组织间的凋亡程度无明显差异;Cytochrome C在心脏中的表达强于肺,说明心脏中线粒体途径的凋亡作用强于肺组织;凋亡因子Fas在肠组织的表达强于心脏,说明在肠组织中,细胞外死亡受体Fas途径的作用强于心脏;而TNFR2在肠、肺和脑中的表达强于心脏,说明在肠,肺和脑中TNFR2途径的凋亡作用强于心脏。（2）同一组织中不同凋亡因子的对比:除脑组织中TNFR2的表达明显强于Fas之外,其余组织中TNFR2和Fas的表达程度无明显差异,说明脑组织中TNFR2途径的凋亡作用强于Fas,而其余组织中TNFR2途径和Fas途径的作用无明显差别;除肠组织中Cytochrome C的表达强度和Bax无明显差异之外,其余组织中Cytochrome C的表达强度均明显强于Bax,说明除了肠组织中MOMP主要由Bax导致,其心、肝、脑、肺和肾组织中还存在Bax之外的因子能导致MOMP,释放Cytochrome C。结论:重症HFMD中各组织的损伤程度不一。各个组织间不同凋亡途径的作用存在不一致的现象;除肠组织外,其余组织中均存在Bax之外的因子能导致MOMP。
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