马铃薯SUMO化成员鉴定及StSUMO1和StSCE1功能研究

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:superyoumyhao
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
类泛素蛋白修饰分子(Small ubiquitin-like modifier,SUMO)修饰是重要的蛋白质翻译后修饰之一,它在改变蛋白质稳定性、亚细胞定位和蛋白质互作关系中起着重要作用。SUMO化修饰广泛参与植物应对干旱、极端温度、盐和营养素缺乏等非生物胁迫。马铃薯根系浅,容易受到多种非生物胁迫的影响,特别是干旱胁迫。揭示马铃薯抗旱的分子机制,进而筛选抗旱性马铃薯品种是保证产量和品质的根本方法。本研究对马铃薯中SUMO化成员进行高通量筛选和鉴定,并探索St SCE1和St SUMO1基因参与马铃薯干旱胁迫响应和调控机制。取得的主要结果如下:1.构建本地隐马尔可夫模型(HMM)在马铃薯全基因组中检索SUMO化途径的成员,并逐个分析保守结构域,最终鉴定出7个SUMO基因、3个SAE(E1)基因、9个SCE(E2)基因和1个SIZ(E3)基因。染色体定位显示SUMO化成员分布在9条不同的染色体上;所有SUMO化基因均为断裂基因,外显子的数量从2到13个不等。2.利用马铃薯数据库中的基因表达数据构建表达谱热图,结果显示马铃薯St SCEs和St SUMOs基因在不同器官中表达量差异明显,St SCE1/3/5/6和St SUMO1在甘露醇和Na Cl胁迫下表达量显著高于对照组。采用q RT-PCR进一步评估所有St SCEs和St SUMOs基因在PEG6000和Na Cl胁迫下的表达量,结果发现St SCE1/5/6/7和St SUMO1在两种胁迫下表达量均表现出显著升高。3.采用酵母双杂交技术在马铃薯文库中筛选St SCE1的互作蛋白,结果鉴定到23种潜在的互作蛋白;挑选其中3个潜在互作蛋白进行全长克隆,并进行酵母双杂交回转验证,最终发现St SCE1与St SUMO1和多酚氧化酶(PPO)互作。4.构建p RI201-AN-St SCE1植物过表达载体,并用农杆菌介导法转化马铃薯栽培品种“大西洋”。转基因株系与野生型相比,株高、根长、鲜重等农艺性状显著增加,这表明St SCE1基因的过表达促进了植株生长。在PEG6000胁迫下转基因马铃薯株系St SCE1基因表达水平显著高于野生型;并且,转基因株系具有更高脯氨酸(Pro)含量、抗氧化能力(TAC)和更低的丙二醛(MDA)含量。结果表明St SCE1参与了马铃薯的耐旱性调控。5.构建双启动子共过表达载体p RI201-AN-St SCE1-St SUMO1,用农杆菌介导法转化马铃薯栽培品种“大西洋”和花序浸染法转化拟南芥。结果发现转基因马铃薯株系的株高、根长、鲜重等农艺性状相比野生型显著增加;转基因马铃薯株系也具有更高的超氧化物歧化酶(SOD)含量、Pro含量、TAC和更低的MDA含量。转基因拟南芥相比野生型拟南芥也表现出更强的抗旱性表型。这表明St SCE1和St SUMO1基因共过表达显著促进了生长,并提高了植株的耐旱性。6.对马铃薯p RI201-AN-St SCE1-St SUMO1转基因株系和野生型植株及其PEG6000胁迫处理后进行转录组分析。结果发现p RI201-AN-St SCE1-St SUMO1转基因株系相比野生型显著上调基因1451个,显著下调基因1470个;p RI201-AN-St SCE1-St SUMO1转基因株系(PEG6000)相比野生型(PEG6000)显著上调基因1559个,显著下调基因1760个;在两组中,573个上调基因和630个下调基因相同。在上调表达的基因中有大量参与氧化还原过程、渗透调节物质积累、苯丙烷类生物合成和防水物质(蜡和木栓质)合成的功能基因。综上所述,马铃薯SUMO化途径与马铃薯干旱胁迫响应密切相关,St SCE1和St SUMO1通过积累渗透调节物质和提高氧自由基清除能力而提高抗旱性。
其他文献
降水不足和降水时空分布不均引起的干旱是导致西北雨养农业区小麦产量低而不稳的首要因素。覆盖种植是提高干旱地区有限降水利用效率的主要栽培措施,但传统地膜覆盖存在高耗低效、残膜污染等问题。秸秆带状覆盖是一种局部覆盖技术,也是一种环境友好型的绿色生产技术,但对其如何影响土壤耗水结构及与产量形成有关的生理机制,目前尚缺乏较全面、系统的研究。为此,在西北半干旱雨养地区,于2015~2019四个冬小麦生长季进行
学位
当归(Angelica sinensis(Olive.)Diels)的早期抽薹,指栽培当归植株二年生提前进入生殖生长阶段,致使其有效成分无法在营养生长阶段累积,药用部位肉质根萎缩纤维化,彻底失去药用价值的现象。早期抽薹严重影响当归的药性及产量,近年来更是成为限制当归生产可持续化发展的关键因素。鉴于传统农艺措施无法从根本上解决当归早期抽薹的问题,人们试图从分子水平探寻早薹的调控机制,但当归存在遗传背
学位
目前,世界范围内的肥胖流行率及与肥胖相关疾病的患病率正在增加。大量研究表明肠道微生物通过影响脂肪和葡萄糖代谢在肥胖及其相关疾病中发挥关键作用。改变饮食结构,增加膳食纤维的摄入是调节肠道微生物的重要途径。而燕麦麸皮作为燕麦加工过程中的主要副产物,含有大量的膳食纤维、酚类物质,具有调节肠道微生物的作用,但因其口感粗糙,未能得到充分利用。超微粉碎技术可以促进原料中营养物质的释放,提高原料的表面性能。现在
学位
<正>【教学目标】1.品读语言文字,感受草地变色的原因,领悟通过细致观察来描写事物变化的真谛;2.通过小组合作观察交流,分享含羞草变化的过程,进一步体会观察的重要性;3.激发学生观察的兴趣,培养写观察日记的习惯。【教学过程】板块一:课前游戏师:看,我给同学们带来了一份礼物!(出示礼盒)谁来猜猜里面是什么?并说明理由。
期刊
马铃薯是世界第三大重要的粮食作物,马铃薯产业的可持续发展对我国的农业生产和粮食安全具有重要意义。马铃薯种质资源丰富,其中彩色马铃薯不仅色彩绚丽,而且营养丰富,它具有较为优良的加工品质、较高的附加值,因此其市场发展潜力无限。彩色马铃薯富含花色素苷,除赋予马铃薯黑红紫等丰富的色泽外,作为植物中最主要的黄酮类物质,花色素苷被证实具有超强抗氧化功能,能够有效抑制炎症反应、提高人体免疫力、防范心血管疾病、提
学位
中药材采后加工在中药药性的形成和品质的提升方面具有重要作用。大黄为蓼科多年生草本药用植物掌叶大黄(Rheum palmatum L.)、唐古特大黄(Rheum tanguticum Maxim,ex Balf).或药用大黄(Rheum officinale Baill.)的干燥根和根茎,甘肃礼县为“中国大黄之乡”,当地在大黄采收后需要采用独特的“烟熏干燥”加工工艺。前期研究发现烟熏干燥可以显著提高
学位
氮(N)是作物生产中最重要的产量限制因素,因此,为了满足全球人口快速增长对粮食的需求常被过量施用。过量氮肥的长期施用不仅降低了作物产量和品质,氮肥利用率持续下降,也造成了大气、水体和土壤等环境的严重污染。秸秆还田会部分消除过量氮肥施用产生的负面效应。本研究依托始于2013年在甘肃省定西市安定区进行的不同氮用量定位试验。定位试验设置6个氮肥施用量(N0:不施氮,对照、N75:施氮量 75 kg ha
学位
中药材非药用部位具有较高的研究和利用价值,探索如何高效、合理、经济地利用这些资源具有重要意义。党参Codonopsis pilosula是食药两用的大宗药材,药用器官为根,地上的茎、叶、花含有大量化学成分,其药用价值的挖掘及利用途径的探索仍有待研究。本试验以党参叶为研究对象,通过UPLC-MS/MS等化学方法探明了党参叶可利用的化学物质基础。基于其优势化学成分,探究了可能具有的重要生理活性。通过体
学位
子宮内膜炎(Endometritis)是影响奶牛养殖业健康发展的主要生殖系统疾病之一,可导致奶牛怀孕率下降,配种次数增加、空怀期延长、妊娠风险增加、产奶量下降,严重者则造成奶牛繁殖力丧失从而增加淘汰率,影响奶牛产业的健康发展。该病在我国的发病率呈上升趋势,并呈现出地域差异,流行情况与病原微生物感染、自身激素水平、继发因素、卫生环境、饲养管理等因素有关。阴道作为奶牛生殖系统重要的微生态区系,对阻止病
学位
包虫病(Hydatid disease),又称为棘球蚴病(Echinococcosis),是由棘球属绦虫中绦期幼虫棘球蚴引起的一种重要的人兽共患寄生虫病,也是世界卫生组织确认的十七种被忽视的热带病之一。三江源地区是青藏高原上棘球绦虫发生流行最严重的地区之一,主要包括多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis)、细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)
学位