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目的:通过研究烧伤后患者增生性瘢痕中铁代谢相关蛋白的表达状况,分析铁代谢相关蛋白表达的变化特点与增生性瘢痕形成的关系,旨在为临床治疗烧伤增生性瘢痕提供新的思路。 方法:(1)病例资料:组织标本均来自2012年12月至2013年3月石家庄市第一医院烧伤整形外科住院患者。患者分3组:A.正常皮肤组。取自外伤及美容手术受术者,共9例。采取正常皮肤标本。B.萎缩性瘢痕组。选取无任何症状的患者9例。因单纯美容需求行瘢痕切除术。C.增生性瘢痕组。选取具有增生性瘢痕典型症状体征的9例患者。后两组患者分别采集瘢痕及其自身正常皮肤标本。术前取血,术中采集标本。(2)检测指标和方法:①采集患者术前血清,临床检测血清铁(serum iron,SI)、总铁结合力(total iron binding capacity,TIBC)、不饱和铁结合力(unsaturated iron-binding capacity,UIBC)、转铁蛋白饱和度(transferrin saturation,TS)及转铁蛋白(transferrin,TRF)。②应用电感耦合质谱分析仪测定三组标本中组织铁含量。③C组,免疫组织化学染色研究铁代谢相关蛋白转铁蛋白受体1(transferrin receptor1,TfR1)、铁蛋白(ferritin,FTL)、二价金属离子转运蛋白1(divalent metal transporter1,DMT1)、膜铁转运蛋白1(ferroportin1,FPN1)等在增生性瘢痕中的表达。④C组,提取蛋白,经免疫印迹法(Western-blot)检测铁代谢相关蛋白的表达量。(3)统计分析:Graphpad5.0统计学处理软件进行分析,采用配对t检验方法及非参数单因素AVONA分析,P<0.05,结果差异显著。实验结果用(x)±s表示。 结果:(1)经检测三组患者的SI、TIBC、UIBC、TS及TRF均无显著差异(P>0.05)。(2)组织铁含量:三组正常皮肤组织中组织铁含量无显著差异(P>0.05)。B组萎缩性瘢痕组织及自身正常皮肤组织中组织铁含量无显著性差异(P>0.05)。C组增生性瘢痕组织比自身正常皮肤组织中组织铁含量升高,差异显著(P<0.05)。(3)C组增生性瘢痕组织及自身正常皮肤组织中均有铁代谢相关蛋白的表达。多表达于胞浆中。在表皮层表达较强。不论免疫组化还是Western-blot,其中DMT1(±IRE)、FPN1以及FTL在增生性瘢痕组织中表达量高于其自身正常皮肤组织(P<0.05)。TfR1在增生性瘢痕组织中表达量却降低(P<0.05)。 结论:(1)增生性瘢痕组患者的血清中铁代谢相关指标均在正常范围内,即本组患者全身处于铁平衡状态。 (2)增生性瘢痕组患者瘢痕局部组织铁含量升高明显,铁蛋白FTL的表达量也上升,这二者都提示瘢痕局部铁元素沉积过多。 (3)增生性瘢痕中,TfR1主要表达在表皮层细胞的胞浆中,表达量较高而在真皮层几乎不表达;DMT1(±IRE)、FPN1以及FTL在表皮层各类细胞的胞浆中呈强阳性表达,真皮层成纤维细胞中表达相对较弱。 (4)增生性瘢痕中,由于铁过载,细胞内仍可能通过IRP/IRE系统调节铁的摄取和释放,而且铁的摄取和释放主要依赖于TfR1以及FPN1的作用而非DMT1(±IRE)。