腹泻是影响犊牛早期生长发育的重要因素之一,严重时会影响犊牛成年后的生产性能。因此,预防与治疗犊牛腹泻是现代奶牛和肉牛养殖中非常重要的工作。利用抗生素替代品调节动物肠道微生物群落结构,包括通过添加益生菌提高动物肠道内益生菌丰度及通过抑菌物质降低肠道内病原菌丰度,是预防犊牛腹泻的重要策略。我们前期研究结果显示,向犊牛母乳或代乳粉中添加益生菌,对降低犊牛腹泻起到一定的积极影响,但效果并不显著,分析其原因可能没有同时添加益生菌所需的低聚糖。有机酸能够抑制肠道内有害微生物,同时对耐酸的益生菌并无不利影响,因此可调节动物肠道菌群结构,有利于维持动物肠道健康。鉴于此,本试验利用益生菌组合与低聚糖组合（低聚半乳糖+低聚果糖）组成了合生元组（A）,利用苯甲酸和富马酸组成有机酸组（B）,并研究了两种组合单独或同时添加（混合组即AB组）对犊牛生长性能及肠道健康的影响。试验一:合生元及有机酸组合对犊牛哺乳期生长发育的影响试验于2021年5月至8月在现代牧业（宝鸡）牧场进行。选取健康状况良好、出生体重相近的荷斯坦母犊牛60头,随机分为四组,每组15头犊牛。四组分别为对照组（C）;合生元组（A）;有机酸组（B）;混合组（AB）。试验期从犊牛1日龄开始,各组犊牛补充相应的添加剂至65日龄断奶,其后继续观察至72日龄。试验期间每天进行犊牛腹泻评分,称量每天的颗粒料采食量,并记录抗生素使用情况。每隔15天及57日龄、65日龄、72日龄对犊牛进行晨饲前称重,并在晨饲前采集颈静脉血。结果表明,添加合生元显著降低了犊牛全期（1-72 d）腹泻率和断奶期（57-72 d）腹泻严重程度（P＜0.05）,添加有机酸降低了犊牛断奶适应期的腹泻率和腹泻严重程度（P＜0.05）。45日龄前,随着犊牛日龄的增长,合生元有提高犊牛日增重的趋势（0.05＜P＜0.10）,45日龄后,各处理对犊牛平均日增重的影响逐渐减弱。三种处理均减少了犊牛哺乳期抗生素的使用频次,并显著地增强了犊牛血清中的总抗氧化能力（P＜0.05）,添加合生元或有机酸组合均显著地降低了血清中丙二醛浓度（P＜0.05）,两种组合同时添加也有降低血清丙二醛浓度的趋势（0.05＜P＜0.10）。各组处理对犊牛颗粒料采食量和料重比均无显著影响（P＞0.05）。试验二:合生元及有机酸组合对犊牛肠道菌群结构的影响为探究各处理对犊牛肠道菌群结构的影响,每隔15天及在57日龄、65日龄、72日龄晨饲后1-2小时,进行犊牛直肠粪便采样,液氮速冻并转移至-80℃冰箱保存。因自断奶适应期开始（57日龄）,相比于对照组,三组处理组的犊牛腹泻率和腹泻严重程度均大幅降低,为探究其机制,基于试验动物采样前15天内未使用抗生素的原则,各组选择了相应的10头57日龄犊牛直肠粪便样本进行16S rDNA测序,以分析处理对肠道菌群结构的影响及其降低腹泻率的微生物机制。结果表明,与对照组相比,有机酸组显著降低了犊牛肠道菌群Chao1指数（P＜0.05）,合生元组β多样性有升高趋势（0.05＜P＜0.1）。添加合生元明显升高了犊牛肠道布劳特氏菌（Blautia）和普雷沃氏菌属（Prevotella）等有益菌相对丰度（P＜0.05）。添加有机酸则显著降低了犊牛肠道Romboutsia-ilealis和大肠杆菌志贺杆菌属（Escherichia-Shigella）等有害菌的相对丰度（P＜0.05）,但添加有机酸也导致布劳特氏菌属（Blautia）和双歧杆菌（Bifidobacterium）等有益菌相对丰度的显著降低（P＜0.05）。而混合组显著升高了巨单胞菌属的相对丰度（Megamonas）（P＜0.05）,两种组合没有明显的加性效应,但显著降低了犊牛直肠粪便中总菌数量（P＜0.05）。为探究犊牛肠道菌群结构与生长性能、血液抗氧化指标及腹泻率之间的关系,本试验利用Spearman方法进行相关性分析。结果表明,总抗氧化能力与犊牛直肠粪便菌群结构的goods-coverage指数呈现显著负相关（R=-0.32,P＜0.05）;断奶期腹泻率（R=0.37）和全期腹泻率（R=0.35）均与菌群PD-whole-tree指数显著正相关（P＜0.05）。X.Ruminococcus.-gnavus-group（R=-0.47）和X.Ruminococcus.-torques-group（R=-0.36）与血液中总抗氧化能力呈显著负相关（P＜0.05）。UCG-005（R=0.45）、Rikenellacea-RC9-gut-group（R=0.34）与犊牛哺乳期平均日增重显著正相关（P＜0.05）,Lachnoclostridium与之显著负相关（R=-0.36,P＜0.05）。Collinsella（R=-0.32）和Catenisphaera（R=-0.33）与断奶期平均日增重呈显著负相关（P＜0.05）。Megamonas与断奶期腹泻率显著负相关（R=-0.42,P＜0.05）。综上,试验处理对犊牛平均日增重、颗粒料采食量及料重比无显著影响。但45日龄前,添加合生元有升高犊牛日增重的趋势,有机酸处理有降低犊牛日增重的趋势。与对照组相比,合生元组在犊牛哺乳期全期,有机酸组在断奶适应期腹泻率显著降低。合生元显著降低了断奶期腹泻严重程度。两种添加剂均缓解了犊牛断奶应激,并降低了血液氧化应激指标。添加合生元显著提高了犊牛肠道内部分有益菌的相对丰度,有机酸则降低了犊牛肠道内有害菌的相对丰度,但同时有机酸的添加也导致了部分益生菌相对丰度的降低。瘤胃球菌属与血液中的总抗氧化能力呈负相关,瘤胃球菌UCG-005等与犊牛平均日增重正相关,Lachnoclostridium与犊牛的平均日增重负相关。柯林斯氏菌属等与断奶期平均日增重呈显著负相关。巨单胞菌属等与犊牛腹泻率负相关。两种组合没有明显的加性效应。