【摘 要】
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目的:IncHI3型质粒可介导细菌间耐药基因的水平传播,促进细菌对多种环境条件的适应。本研究深入分析IncHI3型质粒及其衍生质粒的基因组学与生物信息学特征,旨在探究这些质粒骨架区和外源插入区的保守性与多态性,阐明耐药基因的遗传环境,为感染性疾病的预防和诊疗提供一定的理论指导。方法:选定实验室前期所收集的309株临床分离菌（均属于肠杆菌科细菌）,通过筛查基因（包含16S r DNA、菌种特异性基因
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目的:IncHI3型质粒可介导细菌间耐药基因的水平传播,促进细菌对多种环境条件的适应。本研究深入分析IncHI3型质粒及其衍生质粒的基因组学与生物信息学特征,旨在探究这些质粒骨架区和外源插入区的保守性与多态性,阐明耐药基因的遗传环境,为感染性疾病的预防和诊疗提供一定的理论指导。方法:选定实验室前期所收集的309株临床分离菌（均属于肠杆菌科细菌）,通过筛查基因（包含16S r DNA、菌种特异性基因、耐药基因、以及IncHI3核心骨架基因）PCR扩增实验、改良Carba NP法检测碳青霉烯酶活性实验、以及药物敏感性实验,初步选定19株菌;提取初步选定的菌株基因组,对其进行二代测序和二代测序数据筛查分析,主要通过平均核苷酸一致性比对核定菌种、Res Finder库筛选耐药基因、以及Plasmid Finder和本地基因库筛选复制基因等骨架基因,最终选定8株菌;随后将8株菌进行三代测序,获得8个完整的新测序质粒序列,然后通过BLAST检索IncHI3核心骨架基因又纳入12个Gen Bank质粒,最后本研究进行20个质粒的生物信息学和比较基因组学分析,主要包括初步注释、精细注释、以及绘图。同时选择代表性菌株进行接合转移实验以验证质粒的接合转移能力。结果:1.本研究发现了含有单复制子（repHI3B）、双复制子(repHI3B+rep BIncFIB-6.1)、三复制子(repHI3B+rep BIncFIB-6.1+rep BIncFIB-8.1)的IncHI3型质粒,扩大了IncHI3型质粒的定义范围,即骨架区由复制基因repHI3B和IncHI3核心骨架基因（包含tra1和tra2、par ABC和ter）组成的质粒均可定义为IncHI3型质粒。2.本研究发现了IncFIB-6.1、IncFIB-8.1和IncFIB-6.1:8.1三种型别质粒,骨架区组成均是IncHI3核心骨架基因,然而缺少复制基因repHI3B,而是各自含有独特的复制基因谱,分别为rep BIncFIB-6.1、rep BIncFIB-8.1和rep BIncFIB-6.1+rep BIncFIB-8.1,它们为IncHI3型质粒的衍生质粒。3.本研究中IncHI3型质粒及其衍生质粒含有多种外源插入区,包括13个Tn1696相关区、5个MDR区、2个iuc区、13.8-kb bla SHV-12区、Tn6968、4个rel EB区、3个lac区、以及2个moa区,它们共携带49种耐药基因（涉及对19种抗菌药物的耐药）、2种毒力基因（iuc ABCD-iut A和rmp A2）、以及多种代谢基因（包含乳糖合成和钼蝶呤合成）,而且外源插入区的插入导致其周围质粒骨架区的缺失、易位和倒位。4.质粒pW09308-HI3（IncHI3型质粒）和pE20-1FIB（IncHI3型质粒的衍生质粒）,作为骨架区组成是IncHI3核心骨架基因的代表质粒,均可以通过水平接合转移实验转移至大肠杆菌受体菌中。5.本研究新发现两个新型的移动遗传元件（In1765和Tn7066）以及十个新命名的移动遗传元件（Tn6752、Tn6754、Tn6968和Tn7067-Tn7073）。结论:骨架区由复制基因repHI3B和IncHI3核心骨架基因（包含tra1和tra2、par ABC和ter）组成的质粒均可定义为IncHI3型质粒,IncHI3型质粒复制基因组成具有多样性;IncFIB-6.1、IncFIB-8.1和IncFIB-6.1:8.1型质粒属于IncHI3型质粒的衍生质粒,它们均共享IncHI3核心骨架基因,增强了质粒的稳定性;IncHI3型质粒及其衍生质粒均可自主接合转移,促进其携带的移动遗传元件和各种特性基因（包含耐药基因、毒力基因和代谢基因）传播和流行。
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目的:建立真实环境PM2.5慢性暴露小鼠模型和体外细胞培养,探讨其对心脏结构和功能的影响及其可能的表观遗传学机制。方法:1.动物模型构建与环境监测:48只雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组:过滤空气（FA）组、未过滤空气（UA）组和浓缩PM2.5（CA）组。分别暴露8周和16周,每天6小时（h）。利用气溶胶探测器监测暴露仓内PM2.5浓度,空气动力学粒径谱仪检测粒径分布,同时监测暴露仓内温湿度。
目的:旨在通过对“5+3”医学人才培养模式下临床医学生人文胜任力现状调查及影响因素的分析,系统地了解当前临床医学生医学人文胜任力的整体水平和医学教育过程中存在的问题,探寻影响医学生人文胜任力的关键因素,进而提出相应的对策和建议,以期对开展以岗位胜任力为导向的医学人文教育改革提供参考。方法:1.文献分析法。对“5+3”培养模式下临床医学生人文胜任力的相关文献、书籍、政策文件等充分研读,对临床医学生医
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