罗汉果果皮多糖的提取、结构及抗氧化活性研究

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罗汉果是中国传统的药食同源食物,具有良好的药用价值和保健功能。大量的研究者已证明罗汉果具有抗氧化、抗肿瘤和降血糖生物活性。罗汉果果皮在罗汉果深加工过程中会被剥离并丢弃,造成大量的经济损失。目前,对罗汉果果皮的开发利用研究较少,因此,本论文以罗汉果果皮为原料对罗汉果果皮多糖进行提取,并优化了罗汉果果皮多糖的提取工艺。详细解析了罗汉果果皮多糖的结构特点并对它的抗氧化活性进行了评价。以干燥的罗汉果果皮粉末为原料,结合单因素和响应面,优化得出了罗汉果果皮多糖的最佳水提工艺:提取温度74℃,提取时间3.9 h,料液比27 m L/g,提取次数2次。在此工艺条件下罗汉果果皮多糖的提取得率为27.53±0.31%。通过热水浸提、乙醇沉淀、除色素、除蛋白后冷冻干燥得到了精制的罗汉果果皮粗多糖,经Sephadex G-200分离纯化后得到罗汉果果皮纯多糖,命名为:PSGP。使用化学方法分别测定了PSGP的糖含量和糖醛酸含量分别为94.89±0.11%和34.02±0.12%,表明PSGP是一种酸性多糖。利用高效液相色谱仪测得PSGP的分子量为3.07×10~6Da。由单糖组成分析可知PSGP由阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和半乳糖醛酸组成,且摩尔比分别为1.00:1.84:6.70:2.17。通过甲基化分析可知PSGP的糖链结构主要由以(1→4)连接的葡萄糖和(1→4)连接的半乳糖为主的主链构成,其支链由(1→3)、(1→4)连接的阿拉伯糖,T末端的葡萄糖、T末端的半乳糖、(1→3,4)连接的葡萄糖、(1→4,6)连接的半乳糖和(1→3,6)连接的葡萄糖组成。~1C NMR和~1H NMR显示PSGP中主要存在α构型的糖苷键。体外抗氧化活性表明,PSGP对ABTS、DPPH、羟自由基和超氧阴离子都具有一定的清除能力。使用PC-12细胞进一步在体外进行抗氧化活性发现PSGP能够增强PC-12细胞对H2O2的氧化应激反应的抵抗能力,并呈现剂量依赖性。
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