【摘 要】
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[目 的]探讨miR-1224在PC12细胞OGD/R模型中的表达,分析miR-1224在脑梗死中的作用;进一步在临床实验中验证miR-1224-5p在对照组、脑梗死患者、脑微出血患者中的表达差异,探讨miR-1224-5p与脑微出血的相关性。[方 法]第一部分:培养PCI2细胞,将其分为3个组:正常培养组、糖氧剥夺2h组和糖氧剥夺2h+复糖氧4h组,采用CCK8检测细胞活力,使用Q-PCR法检测
【基金项目】
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云南省教育厅科学研究基金（2019J1257）； 云南省科技厅昆明医科大学应用基础研究联合专项（202001AY070001-057）；
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[目 的]探讨miR-1224在PC12细胞OGD/R模型中的表达,分析miR-1224在脑梗死中的作用;进一步在临床实验中验证miR-1224-5p在对照组、脑梗死患者、脑微出血患者中的表达差异,探讨miR-1224-5p与脑微出血的相关性。[方 法]第一部分:培养PCI2细胞,将其分为3个组:正常培养组、糖氧剥夺2h组和糖氧剥夺2h+复糖氧4h组,采用CCK8检测细胞活力,使用Q-PCR法检测miR-1224表达,采用单因素方差分析分析miR-1224在各组细胞的表达差异。第二部分:收集2021年1月～2022年1月在昆明医科大学第二附属医院神经内科的住院患者,行本院颅脑MRI检查（包括T1、T2、FLAIR、DWI、SWI序列）扫描,将入组患者分为3个组:脑微出血组16例、脑梗死组12例、对照组9例。收集纳入患者的一般资料,肝功、肾功、血脂、糖化血红蛋白、同型半胱氨酸、凝血功能等临床资料,完成中文版蒙特利尔认知评估表（Montreal cognitive assessment,MoCA）、连线测验（trail making test,TMT）、数字广度试验（digit span test,DST）、线段等分测验（line bisection test,LBT）、词语流畅性测验（verble fluency test,VFT）、汉密尔顿抑郁量表（Halmilton depression scale,HAMA）、汉密尔顿焦虑量表量表（Halmilton anxiety scale,HAMD）,收集纳入患者清晨空腹外周血行Q-PCR法检测miR-1224-5p表达。统计分析miR-1224-5p在三组患者间的表达差异、三组患者的认知功能差异,采用sperman分析miR-1224-5p与不同临床指标以及认知功能的相关性,行ROC曲线分析miR-1224-5p对脑梗死及脑微出血的诊断价值。[结 果]1.PC12细胞miR-1224表达三组间差异有统计学意义（F=27.19,p=0.001）,OGD 2h组miR-1224与对照组相比差异有统计学意义（p=0.005）;OGD 2h+R4h组miR-1224与对照组相比差异有统计学意义（p＜0.001）;OGD2h+R4h组miR-1224与OGD2h组相比差异有统计学意义（p＜0.05）。2.临床实验中,MoCA评测结果示CMBs组患者相较于对照组及脑梗死患者认知功能减退（p＜0.05）,其中在注意力、抽象和延迟记忆方面认知功能受损明显（p＜0.05）。在单一认知功能评测中,TMT、LBT、VFT结果显示CMBs患者在注意力/执行功能、视空间、语言功能减退（p＜0.05）。3.三组间外周静脉血miR-1224-5p表达差异采用Kruskal-Wallis秩和检验,差异有统计学意义（Z=22.081,p＜0.001）,脑微出血组与对照组相比差异有统计学意义（p＜0.001）;脑微出血组与脑梗死相比差异有统计学意义（p=0.008）;脑梗死组与对照组相比差异有统计学意义（p＜0.001）4.sperman 分析示 miR-1224-5p 与甘油三脂（r=0.374,p=0.023）、D-二聚体（r=0.421,p=0.009）、连线试验A（r=0.411,p=0.027）、语言流畅试验中语义流畅试验（r=-0.378,p=0.043）具有相关性。5.miR-1224-5p对脑微出血（AUC=0.993）和脑梗死（AUC=0.944）具有显著诊断价值,在脑梗死患者中诊断合并脑微出血具有诊断价值（AUC=0.794）。[结 论]1.miR-1224与PC12细胞OGD/R条件下细胞损伤相关。2.CMBs患者、脑梗死患者外周静脉血miR-1224-5p表达升高,在CMBs患者中表达显著升高。miR-1224-5p对诊断CMBs、脑梗死具有较高的敏感性和特异性,尤其对预测CMBs具有显著诊断价值,外周静脉血miR-1224-5p具有成为CMBs生物标志物的潜力。3.CMBs患者认知功能下降,以注意力/执行功能、视空间、言语功能下降显著。外周静脉血miR-1224-5p水平升高与执行功能、言语功能减退呈正相关。
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