【摘 要】
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目的:本课题旨在研究祛瘀生新方对DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型Th17/Treg细胞分化的调控作用,初步探讨祛瘀生新方治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法:（1）建立DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型,空白对照组和模型组给予生理盐水灌胃干预,实验组给予祛瘀生新方灌胃干预,阳性对照组给予美沙拉嗪干预。干预14天后,观察各组模型小鼠的体重变化、便血情况。（2）H.E.染色检测各组模型小鼠结肠组织病理学改变
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目的:本课题旨在研究祛瘀生新方对DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型Th17/Treg细胞分化的调控作用,初步探讨祛瘀生新方治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法:（1）建立DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型,空白对照组和模型组给予生理盐水灌胃干预,实验组给予祛瘀生新方灌胃干预,阳性对照组给予美沙拉嗪干预。干预14天后,观察各组模型小鼠的体重变化、便血情况。（2）H.E.染色检测各组模型小鼠结肠组织病理学改变;（3）Real-time PCR检测模型小鼠外周血与脾脏中RORγt、Fox P3、IL-10以及IL-17A的m RNA表达水平;（4）Western-blot检测模型小鼠外周血与脾脏中RORγt、Fox P3、IL-10、IL-17A的蛋白表达水平;（5）流式细胞术检测模型小鼠外周血与脾脏中CD4+IL-17+Th17细胞和CD4+CD25+Fox P3+Treg细胞的比例。结果:（1）经DSS诱导造模10天后,观察发现模型组小鼠体重下降,大便带血。解剖后观察到结肠组织充血水肿,肠黏膜溃疡。检测发现,与空白对照组相比,模型组小鼠外周血与脾脏中IL-17A分泌水平明显增高,IL-10分泌水平明显降低,转录因子RORγt表达水平升高,Fox P3表达水平下降,Th17/Treg比例显著增加（P＜0.05）,即造模成功。（2）经祛瘀生新方干预后,与模型组相比,实验组小鼠症状和结肠病理改变均显著改善。具体来看,实验组小鼠外周血和脾脏中IL-17A分泌水平和RORγt活化水平显著降低（P＜0.05）;而细胞因子IL-10和转录因子Fox P3表达水平明显上升（P＜0.05）。可见,祛瘀生新方通过抑制Th17细胞活化,增加Treg细胞活化,显著降低Th17/Treg比例（P＜0.05）,从而抑制DSS诱导的溃疡性结肠炎炎症反应。结论:（1）祛瘀生新方能显著改善DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠的一般情况以及结肠炎症;（2）祛瘀生新方能缓解溃疡性结肠炎小鼠模型的炎症反应,其机制可能是通过下调转录因子RORγt表达,减少Th17细胞分化,抑制促炎因子IL-17A分泌;上调转录因子Fox P3表达,增加Treg细胞分化,促进抑炎因子IL-10分泌,最终起到调节Th17/Treg细胞平衡的作用以减轻UC小鼠的免疫炎症反应。
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