牙龈卟啉单胞菌非编码msRNA P.G_45033与牙周临床指标和牙周组织糖酵解关键酶的关系

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目的:本研究通过对受试者的唾液和龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonans gingivalis,P.gingivalis)非编码ms RNA P.G_45033水平以及牙周组织中糖酵解关键酶水平的检测,探讨唾液和龈下菌斑中非编码ms RNA P.G_45033与牙周临床指标和牙周组织糖酵解关键酶的相关关系,最终为牙周炎的诊断寻找新的潜在生物标志物,进一步探索P.gingivalis导致牙周炎的致病机制。研究方法:本研究纳入30例慢性牙周炎患者及30例牙周健康受试者。收集两组受试者基本信息包括年龄、性别和全身健康情况,记录牙周临床指标包括牙周探诊深度(periodontal probing depth,PD)、临床附着丧失(clinical attachment loss,CAL)和龈沟出血指数(sulcus bleeding index,SBI)。采集两组唾液、龈下菌斑和牙龈样本。Real-time PCR检测两组唾液和龈下菌斑ms RNA P.G_45033水平及牙龈组织糖酵解关键酶包括乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase A,LDHA)、丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2,PKM2)和丙酮酸脱氢酶复合体E1-α亚单位(pyruvate dehydrogenase E1α-subunit,PDHA1)的m RNA水平。免疫组织化学染色法分析两组牙龈组织中LDHA、PKM2和磷酸化丙酮酸脱氢酶复合体E1-α亚单位(phospho-pyruvate dehydrogenase E1α-subunit,p-PDHA1)的蛋白水平。Spearman相关性分析检测ms RNA P.G_45033水平与牙周临床指标和牙周组织糖酵解关键酶的相关关系,受试者工作特征曲线(receiver operator characteristic curve,ROC曲线)评估ms RNA P.G_45033对牙周炎的诊断价值。结果:经多重线性回归模型校正年龄因素后,牙周炎组唾液和龈下菌斑中ms RNA P.G_45033水平显著增高,牙龈组织中LDHA、PKM2的m RNA水平和LDHA、PKM2和p-PDHA1的蛋白水平均显著高于牙周健康组(P<0.001),但两组PDHA1的m RNA水平无明显差异(P>0.05)。Spearman相关性分析结果显示唾液和龈下菌斑中ms RNA P.G_45033的表达水平具有较强的相关性,且与PD和CAL呈较强正相关,与SBI存在较弱正相关。ROC曲线分析显示ms RNA P.G_45033对牙周炎的诊断有着较高的灵敏度和特异度(唾液:AUC=0.8867,P<0.001;龈下菌斑:AUC=0.8861,P<0.001)。唾液和龈下菌斑中ms RNA PG_45033表达水平与牙龈组织中糖酵解关键酶LDHA和PKM2与呈不同程度正相关。结论:与牙周健康者相比,牙周炎患者唾液和龈下菌斑中ms RNA P.G_45033水平显著增高,并与牙周组织糖酵解水平成正相关,提示ms RNA P.G_45033可作为诊断牙周炎的潜在生物标志物。
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