甘蓝型油菜与萝卜远缘杂交的研究

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甘蓝型油菜是经过白菜与甘蓝种间杂交,加倍形成的异源双二倍体。甘蓝型油菜作为异源双二倍体起源时间晚,栽培历史短,育种及生产中遗传基础单一的问题十分突出。自然的甘蓝型油菜严格遵守同源染色体配对的原则,在减数分裂过程中极少出现染色体异常行为,而人工合成甘蓝型油菜不稳定,可产生丰富的遗传变异。通过自然及人工合成的甘蓝型油菜与萝卜杂交,可以进行相关性状的转移,拓宽遗传基础,还有可能创造出新的生物类型。目前,国内外在自然甘蓝型油菜与萝卜远缘杂交及杂种的细胞遗传学方面的研究虽有报道,却为数不多。同时,对人工合成甘蓝型油菜与萝卜远缘杂交及杂种细胞遗传学方面的研究报道还没有。本试验通过胚珠培养获得了自然及人工合成甘蓝型油菜与萝卜的远缘杂种,并对杂种进行了形态学、分子标记和细胞学鉴定,旨在拓宽甘蓝型油菜的遗传基础,为相关性状的转移和创造新的生物材料提供理论依据。主要研究结果如下1.自然和人工合成甘蓝型油菜与萝卜杂交具有一定的受精前亲和性,杂交障碍主要表现为受精后胚发育障碍;亲本基因型影响杂交亲和性的大小;人工合成甘蓝型油菜与萝卜的杂交受精前亲和性低于自然甘蓝型油菜与萝卜的杂交受精前亲和性。2.培养基MS+IAA2.0mg/L+6-BA0.5mg/L+蔗糖3%+琼脂7g/L对于人工合成甘蓝型油菜与萝卜杂交的胚珠培养是合适的,而对于自然甘蓝型油菜与萝卜杂交的胚珠培养效率不高。通过胚珠培养获得了18个甘蓝型油菜与萝卜的远缘杂种,包括自然甘蓝型油菜与萝卜的杂种1个,人工合成甘蓝型油菜与萝卜的杂种17个。其中,有3个杂种自然加倍,通过SSR标记鉴定、体细胞染色体数目观察和花粉母细胞减数分裂染色体基因组原位杂交证明了加倍杂种的真实性。3.甘蓝型油菜与萝卜的杂种形态介于各自双亲之间,既具有母本的某些形态特征,又具有父本的某些形态特征,还出现了双亲都不具有新特征。杂种花色表现有2类。一类为白色,与父本的紫红色和母本的黄色或乳黄色都不同。第二类为白色花瓣上有紫色的条纹,倾向于父本萝卜。4.所有未加倍杂种均无可育花粉,加倍杂种有少量可育花粉。所有未加倍杂种人工授粉均不能结籽。3个加倍杂种K1190D、K1039和K393D的结籽率分别为0、2.60%和1.27%。在开放授粉条件下,未加倍和加倍杂种均可结少量种子。5.加倍杂种K1190D中,染色体平均配对构型是:0.97Ⅰ+19.95Ⅱ+2.29Ⅲ+1.72Ⅳ+0.14Ⅴ+0.07Ⅵ。在单倍体杂种K1190中,染色体平均配对构型是:2.47Ⅰ+9.96Ⅱ+2.07Ⅲ+1.95Ⅳ+0.27V+0.16VI.在加倍杂种K393D中,染色体平均配对构型是:2.12I+17.90II+1.64III+2.26Ⅳ+0-36V+0.37VI.在单倍体杂种K393中,染色体平均配对构型是:4.38Ⅰ+6.59II+1.13III+1.15Ⅳ+0.27V+0.17VI.不管是自然甘蓝型与萝卜的杂种还是人工合成甘蓝型油菜与萝卜的杂种,不管是单倍体杂种还是加倍杂种,除联会形成二价体外,都有单价体和多价体,说明杂种具有不稳定性,将产生广泛的变异。自然甘蓝型油菜与萝卜杂种的二价体数略高于人工合成甘蓝型油菜与萝卜的杂种,暗示人工合成甘蓝型油菜与萝卜的杂种有更大的不稳定性和变异性。6.在加倍杂种K1190D和单倍体杂种K1190以及加倍杂种K393D和单倍体杂种K393花粉母细胞减数分裂中,观察到较高比例的后期Ⅰ染色体桥和染色体落后现象,染色体不规则分离现象以及形成二分体、三分体和五分体等多分体的现象。这也说明甘蓝型油菜与萝卜的杂种具有不稳定性,有可能会产生广泛的变异。
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