目的:1.了解2019年河南省肠杆菌目细菌的耐药情况及分布特点,为临床经验性用药提供科学依据。2.研究河南省耐多黏菌素肠杆菌目细菌的分子机制及流行病学特点,以防耐多黏菌素菌株的传播。方法:1.用WHONET 5.6软件分析2019年河南省144所医院肠杆菌目细菌的药敏情况、耐药特点,以及耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌（Carbapenem-resistant Enterobacteriacea,CRE）的检出情况。比较豫东、豫西等5地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对多黏菌素、替加环素和碳青霉烯的耐药情况,比较二、三级医院检出的大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌对上述3类抗菌药物的耐药情况;采用SPSS 25.0软件进行统计分析,P＜0.05表示差异具有统计学意义。2.收集2019年1月-2019年12月来自河南省6所医院的非重复性耐多黏菌素肠杆菌目细菌13株,其中大肠埃希菌5株,肺炎克雷伯菌8株。通过微量肉汤稀释法测定多黏菌素对临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的最低抑菌浓度（Minimal inhibitory concentration,MIC）,用聚合酶链式反应（Poiymerase Chain Reaction,PCR）技术鉴定所有耐多黏菌素菌株的mcr-1基因和碳青霉烯酶基因(bla KPC、bla NDM、bla IMP、bla VIM、bla OXA-48),通过PCR技术和Sanger测序检测多黏菌素耐药肺炎克雷伯菌中mgr B、pho PQ和pmr AB的突变。进行脉冲场凝胶电泳（Pulsed Field Gel Electrophoresis,PFGE）和多位点序列分型（Multi-Locus Sequence Typing,MLST）,以确定耐多黏菌素分离株之间的亲缘关系。结果:1.2019年河南省肠杆菌目细菌门急诊送检率仅为4.4%（2728/61989）,主要的标本来源为呼吸道标本42.9%（26593/61989）,其次为尿液标本17.6%（10910/61989）。肠杆菌目细菌对大部分抗菌药物具有较高的耐药率,仅对多黏菌素和替加环素具有较高的敏感性,其敏感性均＞90.0%。CRE、耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP）和耐碳青霉烯类大肠埃希菌（Carbapenem-resistant Escherichia coli,CREC）的检出率分别是12.1%（7493/61989）、26.1%（5288/20256）和3.2%（889/27539）。CRKP检出率最高的是豫东地区（32.0%）,CREC检出率最高的是豫西地区（3.5%）,且不同地区差异显著（P＜0.05）。肺炎克雷伯菌对多黏菌素和替加环素的耐药率,以及大肠埃希菌对替加环素的耐药率均有显著地区差异（P＜0.05）。三级医院肺炎克雷伯菌对碳青霉烯的耐药率高于二级医院（P＜0.001）,但二级医院大肠埃希菌对碳青霉烯的耐药率高于三级医院（P=0.01）。2.2019年收集的8株耐多黏菌素肺炎克雷伯菌的MIC为4-64μg/ml,5株耐多黏菌素大肠埃希菌的MIC均为4μg/ml。多黏菌素耐药菌株对大部分抗菌药物具有较高的耐药率。共检出4株携带mcr-1基因菌株,且均为大肠埃希菌,其中1株对碳青霉烯类耐药,同时携带bla NDM和mcr-1基因。8株肺炎克雷伯菌均对碳青霉烯类耐药,且携带bla KPC基因,7株（81.8%）耐多黏菌素肺炎克雷伯菌中检测到mgr B的插入序列,ISkpn14（71.4%）是本研究mgr B中观察到的最常见的插入序列,pho P、pho Q、pmr B中均未发现突变,仅1株在pmr A基因中携带M66I。5株大肠埃希菌分别属于4种序列类型ST2、ST132、ST632和ST983,8株肺炎克雷伯菌均属于ST11。经鉴定大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均属于不同的PFGE型,遗传相似小于95%。结论:1.河南省门急诊标本送检率低,主要的标本类型为呼吸道标本、尿液等。临床分离肠杆菌目细菌总体耐药率偏高,尤其是耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的检出率高于全国水平,且不同地区和不同级别医院都存在显著性差异。提示各级医院在经验使用抗菌药物时应根据本地区和本医院的具体分析结果选择性使用。2.携带mcr-1基因的菌株对多黏菌素耐药水平较低,多黏菌素耐药肠杆菌目表现出广泛的抗菌药物耐药性特征。携带mcr-1基因是河南省大肠埃希菌多黏菌素耐药的主要原因,将ISkpn14插入mgr B是肺炎克雷伯菌多黏菌素耐药的主要原因。PFGE显示多黏菌素耐药菌株均属于不同的克隆型,为散发流行,但需要加强医院感染控制并持续监测,以防耐多黏菌素菌株的克隆传播。