本课题对吴茱萸致肝损伤作用进行了“量-时-毒”关系研究,在此基础上,通过大量文献查阅并结合预测软件确定毒性物质基础研究对象,开展含量测定、细胞毒性研究、实验动物体内肝损伤验证以及毒性伴随的毒代动力学研究,探究吴茱萸肝毒性物质基础,以期为《中国药典》一部收载的吴茱萸质量标准提高提供试验依据和参考。研究内容如下:（1）吴茱萸致肝损伤的“量-时-毒”关系研究通过吴茱萸水提物急性毒性试验得到小鼠的半数致死量（LD50）为64.227 g/kg（以下均以生药量计）,大鼠最大耐受量（MTD）大于88.45 g/kg;单次给药急性肝损伤试验的结果发现40、60、80 g/kg各剂量组均能引起小鼠肝损伤;重复给药肝损伤试验发现连续给药7d,40 g/kg剂量组小鼠表现出明显肝损伤,连续给药14d,20、40 g/kg剂量组小鼠均表现出明显肝损伤,而大鼠连续28 d给予等效剂量的吴茱萸水提物后,却未表现出明显肝毒性。（2）吴茱萸肝毒性物质基础研究结合文献查阅和毒性预测软件Derek Nexus将本章研究对象确定为吴茱萸指标成分即吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素,和其他主要成分即吴茱萸新碱、吴茱萸苦素、去氢吴茱萸碱,共6个化合物;采用超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术（UPLC-Q-TOF/MS）对吴茱萸水提物进行含量测定,得到吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素、吴茱萸新碱、去氢吴茱萸碱的含量分别为0.0834%、0.0419%、1.0921%、0.0016%、0.4193%;采用细胞计数（CCK-8）法,得到吴茱萸水提物的IC50为0.34mg·mL-1,吴茱萸新碱的IC50为70.32μmoL-1,去氢吴茱萸碱的IC50为135.60 μmoL-1,而其余成分对HepG2细胞的增殖均无明显抑制作用;通过吴茱萸主要成分急性肝损伤试验,得到200 mg/kg柠檬苦素、吴茱萸新碱和100 mg/kg的去氢吴茱萸碱腹腔注射能使小鼠血清ALT显著升高（P＜0.05或P＜0.01）,肝体比显著升高（P＜0.05或P＜0.01）,提示200 mg/kg柠檬苦素、吴茱萸新碱和100 mg/kg去氢吴茱萸碱腹腔注射能引起小鼠急性肝损伤。（3）基于LC-MS/MS的毒代动力学研究在毒性伴随的毒代动力学研究中,选取柠檬苦素作为目标分析物,设立吴茱萸水提物灌胃组、柠檬苦素灌胃组、柠檬苦素腹腔注射组,给药剂量分别为60 g/kg、200 mg/kg、200mg/kg,结果得到吴茱萸水提物灌胃组小鼠血浆中柠檬苦素的AUC0-t为 91797.2±31524.4 h·ng/mL、Cmax为11130.0±3047.8 ng/mL,柠檬苦素灌胃组的 AUC0-t 为 138.5±139.3 h·ng/mL、Cmax 为 32.1±14.5 ng/mL,柠檬苦素腹腔注射组的 AUC0-t为 10234.5±6917.3 h·ng/mL、Cmax为 1080.0±296.3 ng/mL。综上所述,吴茱萸水提物致小鼠肝损伤具有一定“量-时-毒”效应,随着给药时间的延长以及剂量的增加,小鼠肝损伤程度加重;通过体外与体内毒性研究发现柠檬苦素、吴茱萸新碱、去氢吴茱萸碱腹腔注射可引起小鼠肝损伤;毒性伴随的毒代动力学研究表明柠檬苦素在体内的吸收较为迅速,在同等剂量下,相比于柠檬苦素单体,吴茱萸水提物入血后,柠檬苦素在体内吸收更快、暴露量更大,且肝损伤表现程度更重。本研究明确了吴茱萸水提物致肝毒性的“量-时-毒”关系,初步阐释了吴茱萸中6个主要成分与吴茱萸水提物致肝毒性的相关性,揭示了吴茱萸水提物致肝毒性与柠檬苦素在体内暴露量的相关性,为临床安全使用吴茱萸提供了数据支持,为制备安全性更高的吴茱萸制剂提供科学依据,为药典吴茱萸质量标准提高提供了参考数据,也为其他有毒中药的毒性物质研究提供了新思路。