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目的:观察补肾活血法对快速老化SAMP8小鼠学习记忆以及脑内β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)代谢的影响,并研究其作用的可能机制,为补肾活血法临床治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)提供基础实验证据。材料与方法:选取32只SAMP8雄性小鼠(七月龄),每组8只,分别为模型组、中药组、针刺组和西药组(根据随机匹配的方法分为4组),同时选取同月龄同性别同数量的SAMR1小鼠为正常对照组。在中药组中,将按照6 g/kg的补肾活血方进行灌胃给药,针刺组则选取SAMP8小鼠双侧“肾俞”、“百会”、“太溪”进行针刺干预,西药组给予盐酸多奈哌齐灌胃,给药量为3 mg/kg,正常组和模型组小鼠给予生理盐水灌胃,保证灌胃时间相同,给予的生理盐水体积相同,每组连续灌胃4 W。采用水迷宫实验和絮窝实验观察小鼠行为学变化,采用ELISA法检测各组小鼠大脑皮层Aβ的含量,采用免疫组织化学法和酶活性检测法检测各组小鼠大脑皮层β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(β-site APP cleaving enzyme1,BACE1)表达和活性,采用免疫组织化学法和Western blot法检测各组小鼠大脑皮层胰岛素降解酶(Insulin degrading enzyme,IDE)的分布和表达。结果:1.采用水迷宫和絮窝实验检测小鼠行为学。水迷宫实验结果显示,与正常对照组SAMR1雄性小鼠比较,模型组SAMP8雄性小鼠的潜伏期延长、穿越平台的次数明显减少(P<0.05);相比于模型组SAMP8雄性小鼠,中药组、针刺组和西药组的小鼠潜伏期缩短、穿越平台次数增加(P<0.05);而给予中药、针刺和西药干预的三组小鼠间比较无显著性差异(P>0.05)。絮窝实验结果显示,与对照组SAMR1小鼠相比,模型组SAMP8小鼠的絮窝实验评分明显降低(P<0.05),而从第四天开始,中药组和西药组SAMP8小鼠的絮窝评分明显比模型组高(P<0.05),针刺组SAMP8小鼠与模型组相比虽然有升高的趋势,但无统计学意义(P>0.05)。2.采用ELISA法检测小鼠大脑皮层Aβ的含量。与正常对照组SAMR1小鼠相比,模型组SAMP8小鼠大脑皮层Aβ含量明显增高(P<0.05);与模型组相比,中药组、针刺组及西药组SAMP8小鼠大脑皮层Aβ含量明显降低(P<0.05);与西药组相比,中药组和针刺组SAMP8小鼠大脑皮层内Aβ含量无明显差异(P>0.05);西药组、针刺组和中药组小鼠大脑皮层内Aβ含量相互比较均无显著性差异(P>0.05)。3.采用免疫组织化学法和酶活性检测法检测小鼠大脑皮层BACE1的表达及活性。免疫组织化学法结果显示,正常对照组SAMR1小鼠大脑皮层神经细胞形态完整,排列有序,无明显BACE1阳性染色;与正常对照组SAMR1小鼠相比,模型组SAMP8小鼠大脑皮层内BACE1阳性细胞数量明显增多,染色加深;与模型组小鼠相比,中药组、针刺组和西药组SAMP8小鼠BACE1阳性细胞染色较浅,阳性细胞数量减少。采取酶活性检测法检测小鼠大脑皮层BACE1活性,结果显示,与正常对照组SAMR1小鼠相比,模型组SAMP8小鼠BACE1活性明显增高(P<0.05);与模型组小鼠相比,中药组和西药组BACE1酶含量降低(P<0.05)。4.采用免疫组织化学法和Western blot法检测小鼠大脑皮层IDE的表达。免疫组织化学法结果显示,正常对照组SAMR1小鼠大脑皮层IDE阳性表达明显,颜色呈棕褐色且染色偏深,分布较均匀;与对照组相比,模型组SAMP8小鼠IDE阳性染色细胞数量显著减少,并且染色偏浅;同时,与模型组SAMP8小鼠相比,中药组、针刺组和西药SAMP8小鼠IDE阳性细胞数量增多,染色程度加深。Western blot实验结果显示,与正常对照组SAMR1小鼠相比,模型组SAMP8小鼠大脑皮层IDE蛋白表达明显下降;与模型SAMP8小鼠相比,中药组、针刺组和西药组SAMP8小鼠大脑皮层IDE表达水平有所提高;中药组、针刺组和西药组三组比较,SAMP8小鼠大脑皮层内IDE的蛋白含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.补肾活血法可减少SAMP8小鼠大脑皮层Aβ的含量,从而改善SAMP8小鼠的认知功能障碍。2.补肾活血法可通过抑制BACE1表达减少Aβ生成,同时促进IDE的表达加速Aβ降解,使其SAMP8小鼠大脑皮层Aβ含量减少。