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研究背景和目的高危型人乳头状瘤病毒（High-risk human papilloma virus,HR-HPV）的持续感染被认为是导致宫颈癌的主要原因。世界卫生组织推荐HPV检测作为宫颈癌的初级筛查方法。HPV检测的高敏感性可以发现大多数宫颈高级别鳞状上皮内病变或更严重的病变（High-grade squamous intraepithelial lesions or worse,HSIL+）,但同时,HPV检测的低特异性也会导致不必要的恐慌。因此,为HPV检测阳性的女性选择合适的分流方法至关重要。细胞学检测是目前临床上常见的HR-HPV阳性的分流方法,具有较高的特异性,但细胞学检测依靠人工阅片,其结果常受到细胞样本量和细胞学家能力的限制。此外,HPV16/18感染的女性存在宫颈上皮内瘤变 3 级（Cervical intraepithelial neoplasia grade 3,CIN3）和隐匿性宫颈癌的风险最高,因此即使细胞学结果为阴性,也应立即进行阴道镜检查和活检,目前尚没有合适的分流方法,最终导致了较高的阴道镜转诊需求。然而,阴道镜引导下活检的准确性也常常受到阴道镜医师技术水平以及宫颈转化区类型的限制。绝经后女性或是伴有宫颈Ⅲ型转化区（Type Ⅲ of cervical transformation zone,TZ Ⅲ）HR-HPV感染的女性,因宫颈萎缩或病变隐匿,常常面临漏诊的问题。面对目前宫颈癌筛查工作中的难题,基因甲基化检测的出现带来了新的希望。目前,已有许多研究证明了基因甲基化与宫颈癌之间的密切联系,并鉴定出多个有潜力的候选基因,例如锌指蛋白582（Zinc finger 582,ZNF582）,配对盒子1（Paired box 1,PAX1）,红细胞膜蛋白配体4.1样3（Erythrocyte-membrane protein band 4.1-like 3,EPB41L3）,序列相似家族 19 成员A4 重组蛋白（Recombinant family with sequence similarity 19,member A4,FAM1 9A4）,连接粘附分子 3（Junctional adhesion molecule 3,JAM3）,可以作为HR-HPV感染女性分流宫颈上皮内瘤变3级及以上（Cervical intraepithelial neoplasia grade 3 or worse,CIN3+）的良好分流方法。本研究的目的是验证ZNF582和PAX1基因甲基化检测在HR-HPV感染人群中的分流价值,并进一步探索其在特殊人群,如高致癌性HPV16/18感染伴高阴道镜转诊需求,或者是年龄≥50岁（绝经后）或伴有TZⅢ容易漏诊的HR-HPV感染女性中的应用价值。材料和方法收集2018年到2020年至郑州大学第一附属医院就诊的424名HR-HPV感染女性的年龄、HPV类型、ZNF582和PAX1基因甲基化检测结果、细胞学检测结果和病理学结果的完整信息。本研究中的所有患者均采用罗氏HPV检测和液基细胞学检测（Liquid-based cytology,LBC）的常规宫颈癌筛查方法。其中ZNF582和PAX1基因甲基化检测是在湘雅医学实验室进行（根据湘雅医学实验室的规定,PAX1的△Cp≤9或ZNF582的△Cp≤11被定义为高甲基化）。所有细胞学和病理学结果均由两名细胞学专家和两名病理学家独立进行了诊断。结果1.各检测方法在HR-HPV感染女性中的分流价值ZNF582和PAX1甲基化检测、LBC检测和HPV16/18检测,检测CIN3+的敏感性、特异性、阳性预测值分别为70.7%/89.8%/77.3%、61.4%/90.1%/75.4%、72.1%/59.9%/47.0%和 77.9%/44.7%/41.0%。ZNF582和PAX1甲基化检测,检测CIN3+的特异性显著高于LBC检测（P＜0.01）和HPV16/18检测（P＜0.01）,同时ZNF582甲基化检测和LBC检测,检测CIN3+的敏感性显著高于P4X1甲基化检测（P＜0.05）。2.各检测方法在高致癌性HPV16/18感染女性中的分流价值检测CIN3+的阳性似然比和约登指数最高的前三名检测分别是ZNF582（7.99 和 0.672）、PAX1（7.07 和 0.544）和ZNF582＆PAX1（5.71 和 0.664）甲基化检测。此外,ZNF582、PAX1和ZNF582＆PAX1三种基因甲基化检测对检测CIN3+的特异性分别为90.4%、91.0%和85.9%,均显著高于LBC检测（64.1%）（P＜0.001）,其中,ZNF582和ZNF582＆PAX1甲基化检测,检测CIN3+患者的敏感性分别为76.8%和80.5%,显著高于PAX1甲基化检测（63.4%）（P＜0.05）。3.各检测方法在年龄≥50岁或伴有TZ Ⅲ的HR-HPV感染女性中的分流价值在宫颈 Ⅰ 型或 Ⅱ 型转化区（Type Ⅰ or Ⅱ of cervical transformation zone,TZⅠ/Ⅱ）组和年龄＜50岁组中,LBC检测对检测CIN3+的敏感性分别为65.4%和68.8%,高于PAX1甲基化检测（48.7%和55.2%）（P＜0.05;P=0.06）,但在TZ Ⅲ组和年龄≥50岁组中,LBC检测CIN3+的敏感性与PAX1和ZNF582甲基化检测相似,不再具有明显优势。而且,在两个年龄组中（年龄＜50岁;年龄≥50岁）,LBC检测 CIN3+的特异性（59.0%;62.0%）,均显著低于 ZNF582（89.3%;91.1%）和PAX1甲基化检测（89.8%;91.1%）（P0.001）。在两个 TZ 组中（TZ Ⅰ/Ⅱ;TZ Ⅲ）,LBC 检测 CIN3+的特异性（61.6%;58.5%）,均显著低于 ZNF582（85.6%;93.1%）和PAX1甲基化检测（89.6%;90.6%）（P＜0.001）。结论ZNF582甲基化检测在HR-HPV感染人群中分流CIN3+的能力明显优于PAX1甲基化、LBC和HPV16/18检测。同时,对于高致癌性HPV16/18感染人群以及年龄≥50岁或伴有TZ Ⅲ易漏诊的HR-HPV感染人群,ZNF582甲基化检测也展现出良好的CIN3+分流价值,可以被认为是一种有潜力的宫颈癌筛查分子标志物。