【摘 要】
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[目的]从五-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）及其受体介导信号通路的角度探究广叶绣球菌多糖（SCPs）对免疫低下小鼠海马及皮质损伤的干预作用,从而为广叶绣球菌多糖作为功能食品原料开发提供理论依据。[方法]将60只6周龄雄性昆明小鼠随机分为六组:空白对照组（NC）、模型组（CY）、SCPs低剂量组（CY+LD）、中剂量组（CY+MD）、高剂量组（CY+HD）和阳性对照组（C
【基金项目】
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山西省重点研发计划重点项目（201603D21106,201703D211001-06）； 山西农谷建设科研专项（SXNGJSKYZX201903）； 食用菌山西省科技创新重点团队； 黄土高原食用菌提质增效协同创新中心；
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[目的]从五-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）及其受体介导信号通路的角度探究广叶绣球菌多糖（SCPs）对免疫低下小鼠海马及皮质损伤的干预作用,从而为广叶绣球菌多糖作为功能食品原料开发提供理论依据。[方法]将60只6周龄雄性昆明小鼠随机分为六组:空白对照组（NC）、模型组（CY）、SCPs低剂量组（CY+LD）、中剂量组（CY+MD）、高剂量组（CY+HD）和阳性对照组（CY+LH）。饲养期间小鼠自由摄食、饮水。在恒温恒湿的环境下,适应性喂养1周,除NC组腹腔注射生理盐水外,其余各组小鼠连续3 d腹腔注射浓度为80 mg/kg.bw/d的环磷酰胺（CY）。建模成功后剂量组分别灌胃100、200和400mg/kg.bw/d的广叶绣球菌多糖,阳性对照组灌胃浓度为40 mg/kg.bw/d的盐酸左旋咪唑（LH）,空白对照组和模型组灌胃等量生理盐水,共饲养30 d,空腹24 h后,采集样品。（1）采集海马组织,HE染色法观察海马组织形态的变化;ELISA检测海马中5-HT、TPH2和c AMP的含量;实时荧光定量聚合酶链反应（q RT-PCR）法测定海马中TNF-α、IL-1β、5-HT1AR、PKA、BDNF m RNA的相对表达量;Western Blot（WB）法和免疫组化法（IHC）测定海马中CREB和p-CREB蛋白的表达量。（2）采集皮质组织,HE染色法观察皮质组织形态的变化;试剂盒测定皮质中MDA、SOD、CAT和GSH-Px水平的变化;ELISA法检测皮质中5-HT、TPH2、TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的含量;q RT-PCR法测定皮质TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、5-HT2CR、Ca M和BDNF m RNA的相对表达量;WB和IHC测定皮质中CREB、p-CREB、Ca MKⅡ和p-Ca MKⅡ蛋白的表达量。[结果]（1）与空白对照组相比,模型组海马神经细胞排列松散稀疏,细胞间出现间隙,胞核出现固缩深染现象,损伤明显;TNF-α和IL-1βm RNA表达量极显著升高（P＜0.01）,5-HT、TPH2、c AMP含量,5-HT1AR、PKA、BDNF m RNA表达量和CREB和p-CREB蛋白表达量均降低,差异极显著（P＜0.01）。与模型组相比,各剂量组海马神经细胞排列较为紧密且数量增多,呈剂量效应关系;各剂量组5-HT和TPH2含量以及中高剂量组c AMP含量均极显著升高（P＜0.01）,高剂量组5-HT1AR、PKA、BDNF m RNA表达量和CREB、p-CREB蛋白表达量均显著增加（P＜0.05或P＜0.01）,TNF-α和IL-1βm RNA表达量降低,差异显著或极显著（P＜0.05或P＜0.01）。（2）与空白对照组相比,模型组皮质神经细胞形态不规则,稀疏且排列松散,出现核固缩深染,损伤明显;MDA含量和TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10基因表达量均极显著升高（P＜0.01）;SOD、CAT、GSH-Px活性,5-HT、TPH2含量,5-HT2CR、Ca M、BDNF m RNA表达量和p-CREB、Ca MKⅡ、p-Ca MKⅡ蛋白表达量均降低,差异极显著（P＜0.01）。与模型组相比,各剂量组皮质神经细胞数量增多,结构趋于完整;各剂量组MDA含量,高剂量组TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10的m RNA表达量均极显著降低（P＜0.01）;高剂量组SOD、CAT、GSH-Px的活性,5-HT、TPH2含量,5-HT2CR、BDNF、Ca M m RNA表达量和p-CREB、Ca MKⅡ、p-Ca MKⅡ蛋白表达量均升高,差异极显著（P＜0.01）。[结论]（1）广叶绣球菌多糖能增加免疫低下小鼠海马组织神经元的数量,修复受损海马组织,改善细胞因子TNF-α、IL-1β和神经递质5-HT的分泌水平,并通过5-HT1A受体增强其介导的c AMP-PKA-CREB-BDNF信号通路作用,最终发挥保护海马组织的作用。（2）广叶绣球菌多糖能增加免疫低下小鼠皮质组织神经元的数量,修复受损皮质,提高抗氧化能力,改善细胞因子TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-10和神经递质5-HT的分泌水平,并通过5-HT2C受体增强其介导的Ca M-Ca MKⅡ-CREB-BDNF信号通路作用,最终发挥保护大脑皮质的作用。
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