心力衰竭即心衰（Heart Failure,HF）是目前全球临床和公共卫生的巨大挑战,发病率及死亡率一直居高不下[1],我国目前最新心血管疾病报告显示:我国心衰患病率为0.9%,发病率0.7‰-0.9‰,到2018年为止我国总共有450万心衰患者[2-4]。心衰的药物治疗已经规范化,器械治疗也比较先进,但是心衰患者住院率及死亡率依旧居高不下。近年来干细胞和微囊泡（Microversicles,MVs）相关研究备受关注,已有诸多相关证据提示:干细胞及微囊泡治疗可以在提升心功能、促进血管生成、促进细胞再生方面有一定的作用[5]。各类亚型细胞都可以在活化或凋亡时释放微囊泡,其具有信号传递、细胞间通信、组织重塑的作用[6]。本实验前期研究[7,8]及文献检索[9]提示:心衰过程中的心肌重构可能与微囊泡相关,进一步发现微囊泡在心衰病理过程的作用机制,可能给心肌重构的治疗从根本上提供新思路。本研究拟通过分析心衰患者循环血中微囊泡基本特性;对比分析心衰患者与健康受试者循环血中微囊泡蛋白质及mi RNA变化入手,初步探讨循环血液微囊泡在心衰的作用。本实验纳入心衰组及健康对照组受试者,提取血浆,并采用排阻+超滤法提取微囊泡;电镜观察其形态、纳米粒径分析其浓度及粒径大小、Western Blot检测表面标志蛋白对微囊泡进行鉴定;对鉴定合格的微囊泡进行蛋白组学及mi RNA分析,得到差异表达蛋白及mi RNA,最后通过心肌细胞及微囊泡共培养验证微囊泡的作用。本实验两组基线资料中年龄、体重、性别无显著性差异,心脏射血分数（Ejection Fraction,EF）及B-型钠酸肽（Brain Natriuretic Peptide,BNP）差异明显,有统计学意义;心衰组微囊泡浓度为每毫升5.7×1010个微囊泡,粒径峰值为93.2nm,健康对照组微囊泡浓度为每毫升1.5×1010个微囊泡,粒径峰值为129.1nm,心衰组微囊泡浓度显著高于健康对照组,但粒径小于健康对照组（P＜0.05）;透射电子显微镜观察微囊泡的形态,镜下可见健康对照组和心衰组微囊泡呈形态均一的茶杯状,形态无显著差异,Westernblot实验证明,两组均表达Tsg101、CD63、CD9典型微囊泡阳性标志物,不表达微囊泡阴性标志物Calnexin,从而验证了提取物为微囊泡,符合微囊泡国际认定标准;心衰组发现蛋白310种,健康对照组218种蛋白,两组进行差异蛋白统计发现共21种差异蛋白,其中8种差异蛋白上调,13种差异蛋白下调;差异表达蛋白基因本体论（Gene Ontology,GO）注释分类统计显示:补体激活经典途径、补体活化调控、识别吞噬作用、中性粒细胞脱颗粒等生物学过程,微囊泡、细胞外空间、质膜外侧、血液微粒等细胞组分,抗原结合、免疫球蛋白结合分子功能有明显比例差异;注释到补体和凝血级联、扩张型心肌病、吞噬体京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）通路的蛋白数量显著;两组共23种差异表达mi RNA,其中14种差异mi RNA上调,9种差异mi RNA下调,差异表达mi RNA在HMDD数据库注释到心衰相关mi RNA 8个,其中3个上调mi RNA,5个下调mi RNA;红色PKH26标记微囊泡,心肌细胞贴壁后,分别与心衰组、健康对照组外周血微囊泡共培养12小时,蓝色Hochest标记细胞核,绿色鬼笔环肽标记细胞骨架,结果可见AC16细胞内化微囊泡;细胞贴壁后加入50μg微囊泡进行共培养24小时后,普通显微镜下可观察到心衰组细胞状态较对照组显著变差,细胞呈凋亡趋势;进一步细胞活力定量检测显示,心衰组微囊泡处理组的心肌细胞细胞活性显著降低;通过ELISA检测心肌细胞与两组微囊泡共培养后,心肌细胞相关凋亡蛋白的表达情况,结果显示:心衰组微囊泡作用后,心肌细胞内凋亡相关蛋白caspase9显著升高。基于上述研究,我们可以得出以下三个结论:1.心衰患者循环血可分离提取到微囊泡,并且较健康对照组数量增多。2.循环血液中微囊泡通过参与炎症反应、心肌细胞凋亡等过程,参与心衰的进展。3.循环血中微囊泡通过内容物介导心衰发展,是心衰病理过程中的重要介质。