新生猪缺氧缺血性脑损伤后脑内髓鞘相关蛋白表达变化的研究

来源 :中国医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhanchuangye
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目的新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)造成新生儿脑白质损伤,具有挺高的致死率,存活的患儿也有很大的概率遗留下一部分神经系统后遗症,癫痫、认知障碍等比较容易见到。我应用了新生猪缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)模型,研究新生猪HIBD后脑内髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)、髓鞘相关糖蛋白(myelin associated glycoprotein,MAG)在脑白质中表达的变化趋势,明确缺氧缺血后少突胶质细胞和髓鞘的动态变化趋势,为进一步探讨HIE发病机制提供理论基础和实验依据。方法将出生后3~5天的健康新生猪共28头随机分为对照组4头和HI模型组24头。根据HI后的时间,将HI模型组分为6个亚组,每组4只,分别为0~2 h、2~6 h、6~12 h、12~24 h、24~48 h、48~72 h亚组。获取脑组织切片进行免疫荧光(immunofluorescence,IF)染色和免疫组化(immunohistochemistry,IHC)染色,应用显微镜及图像采集软件对图像进行采集,应用Image Pro Plus软件算出图像的光密度(optical density,OD)值,应用SPSS 24.0软件统计分析,差异有统计学意义的标准为P<0.05。结果HI后MBP的表达整体上呈现出下降的趋势,IHC与IF染色结果基本一致,6~12 h达到最低值,而后略有升高;与对照组比较,HI模型组0~2 h、2~6 h、6~12 h、12~24 h、24~48 h、48~72 h亚组MBP的表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。同时IF染色结果显示与HI模型组0~2 h亚组相比,HI模型组2~6 h、6~12 h、12~24 h、24~48 h、48~72 h亚组MBP的表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。MOG在脑白质中IHC和IF的特点整体为先升再降的趋势,IHC染色6~12 h达到最高值,而后降低,与HI模型组6~12 h亚组相比,HI模型组0~2 h、2~6 h、12~24 h、24~48 h、48~72 h亚组及对照组MOG的表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。IF染色的峰值出现在12~24 h亚组,2~6 h亚组、6~12 h亚组、12~24 h亚组之间无显著性差异(P>0.05)。与HI模型组6~12 h、12~24 h亚组相比,对照组、HI模型组0~2 h、24~48 h、48~72 h亚组的MOG均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。MAG的表达整体呈下降的趋势,IHC与IF染色趋势基本一致,12~24 h达到最低值,而后略有升高;与对照组比较,HI模型组2~6 h亚组、6~12 h亚组、12~24 h亚组、24~48 h亚组、48~72 h亚组MAG的表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1.HIBD后脑白质内MBP、MOG、MAG的表达水平在短时间内即可发生变化,说明髓鞘比较容易受到缺氧缺血的影响。2.发育中的大脑细胞增生比较活跃,在应对损伤时具有一定的修复能力,HIBD后MBP、MAG的表达水平在下降后会略有升高,说明髓鞘损伤后可继发脑内少突胶质细胞再髓鞘化,但是在HI早期,这种修复机制难以有效的代偿。
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