拟穴青蟹（Scylla paramamosain）主要分布在我国福建、广东、广西、浙江等沿海区域的主要经济蟹类之一,蜕壳伴随甲壳类动物一生,刚蜕壳的蟹被称为软壳蟹,因其全身可食,味道鲜美,营养丰富而广受消费者的喜爱。然而,拟穴青蟹蜕壳速度快,壳硬化时间短,以致软壳蟹生产效率低,浪费大量人力物力,这些问题严重阻碍拟穴青蟹软壳蟹养殖业的可持续发展。因此,通过Sp17E2DH基因对壳硬化的调控作用及不同蜕壳时间点营养物质比较分析,对理解蜕壳发生的分子调控探索,丰富甲壳类蜕壳研究进展,减少在软壳蟹生产过程中效率低具有重要理论意义和实际应用价值。为了比较拟穴青蟹蜕壳前后不同时间点的营养品质和风味差异,采用顶空固相微萃取（SPME）、气质联用（GS-MS）方法测定了拟穴青蟹硬壳蟹与蜕壳后0-48 h软壳蟹肌肉和肝胰腺水分、灰分、氨基酸、矿物质元素、脂肪酸和风味物质含量。结果发现:拟穴青蟹在蜕壳0-6h水分含量最高;灰分含量随着壳硬化时间增加而增加;可食组织中的17种氨基酸蜕壳前均高于蜕壳后,其中甘氨酸、精氨酸和亮氨酸存在显著性差异（P＜0.05）,肌肉和肝胰腺组织蜕壳后6 h氨基酸含量高于其他时间点。在5种矿物质元素当中,Mg和Fe在肌肉和肝胰腺组织中比硬壳蟹含量高,与蜕壳前硬壳蟹差异不显著,蜕壳后0 h Ca的含量显著高于蜕壳后其它时间点（P＜0.05）。肌肉组织中蜕壳后24 h的PUFA高于蜕壳后其它时间点,肝胰腺组织中蜕壳后0 h的PUFA高于蜕壳后其它时间点。所测肌肉和肝胰腺中挥发性物质包括烷烃类、醛类、酮类、醇类、芳香烃类、酯类、酚类和醚类化合物,总体相对含量并无显著性差异。综上比较,拟穴青蟹蜕壳后0-6h可食组织肝胰腺和肌肉比其它时间点更具营养、且风味更加,适合老人和孩子食用,也是最佳软壳蟹制取时间。从拟穴青蟹肝胰腺中获得了17β-雌二醇脱氢酶（17E2DH）的部分cDNA序列,克隆得到17E2DH全长为922bp,5’非编码区（5’UTR）为35 bp,3’非编码区（3’UTR）为125 bp,开放阅读框（ORF）长为768 bp,能编码255个氨基酸组成的多肽,分子量为26.7k Da。经氨基酸多重序列比对及系统进化树分析表明17E2DH氨基酸序列与其他甲壳类动物如南美白对虾（Litopenaeus Vannamei）和三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）都具有高度相似性。然后,RT-q PCR结果表明,Sp17E2DH在TQ（蜕壳前）、TH3 h（蜕壳后3 h）和TH48h（蜕壳后48 h）均有表达,TQ表达量最低,TH48 h的表达量最高。利用WB和免疫组化（IHC）技术在拟穴青蟹肝胰腺和肌肉组织中都检测到17E2DH的表达,结果表明Sp17E2DH在肝胰腺组织中的表达高于在肌肉组织。最后,RNA干扰（RNAi）实验旨在了解Sp17E2DH外壳变硬在蜕壳中的作用,在脱壳后1h注入ds RNA,TH48 h螃蟹壳在四个位置的硬度均显着低于对照组（P＜0.05）。在RT-q PCR和WB分析的基础上,TH48 h的肝胰脏和肌肉组织明显低于对照组（P＜0.05）。这些结果表明RNAi可以有效地延长壳硬化时间,Sp17E2DH在蟹壳的硬化中起着至关重要的作用,为软壳蟹的生产具有指导作用。