GO/PRP凝胶促进兔上关节囊重建术后筋膜—骨界面愈合的实验研究

来源 :西南医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiezuoyaoxiezuoyao
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目的:肩关节上关节囊重建是针对巨大肩袖损伤和不可修复肩袖损伤的重要手术方法,在临床上关于上关节囊重建术的报道中,该手术可以恢复肩关节上方稳定性、提供组织完整性和足够的力学支持并取得良好的临床结果,但其术后再撕裂率高也引起研究者关注。目前临床上关节囊重建移植物多为自体阔筋膜、脱细胞人真皮移植物,但上关节囊重建术后移植物与骨界面的组织学研究还较少。移植物-骨界面愈合程度是影响肩袖损伤修复的重要因素,目前采用多种方式促进肩袖组织愈合,其中应用富含生长因子的富血小板血浆(Platelet Rich Plasma,PRP)是临床常用手段,但其存在半衰期短,爆发式释放、稳定性差等缺点。氧化石墨烯(Graphene Oxide,GO)是目前世界上研究最多的纳米材料之一,由于其具有独特的生物兼容性、可靠性和力学性能,可以作为许多药物和化学材料的载体,被称为“明星材料”。GO与PRP两者合在一起可以达到一种持续、稳定的生长因子释放效果。本研究以中医学伤筋理论为指导,将GO/PRP凝胶应用于兔上关节囊重建模型,探讨GO/PRP凝胶对兔上关节囊重建模型早期筋膜-骨界面愈合的影响,为上关节囊重建术后促进筋膜-骨界面愈合提供新方法。方法:将60只发育成熟的雄性新西兰兔,月龄4月左右,体重接近,将其随机分为五个组:A组:空白组(n=12只)、B组:不可修复组(n=12)、C组:上关节囊重建组(n=12只)、D组:上关节囊重建+PRP组、E组:上关节囊重建+GO/PRP凝胶组(n=12只)。A组为空白组,不做任何干预。B、C、D、E组四组通过手术造成不可修复损伤模型,术后予以旷置4周。4周后B组不予以干预;C组予以行上关节囊重建;D组在上关节囊重建的基础上予以PRP支架干预;E组在上关节囊重建的基础上予以GO/PRP凝胶干预。术后4周、8周每组分别取6只兔子行Tarlov评分评估其右肩关节运动功能;MRI检查评估筋膜(腱)-骨部位的影像学情况;MRI检查结束后处死取材,常规石蜡包埋切片行苏木素-伊红染色(Hematoxylin-Eosin Staining,HE)和Masson三色染色(Masson trichrome staining)观察移植物-骨界面部位形态结构情况;并且对标本行生物力学检测,评估其力学性能的恢复情况。结果:1、Tarlov评分:术后4周观察,A组评分均为5分,该组评分明显高于其余四组,与四组之间差异具有统计学意义(P<0.05),C组、D组E组三组之间差异无统计学意义(P>0.05);B组与其余四组差异具有统计学意义(P<0.05)。术后8周观察,A组评分均为5分,该组评分高于其余四组,其中A组与E组差异无统计学意义(P>0.05),B组与其余四组差异具有统计学意义(P<0.05),E组与C组、D组之间差异有统计学意义(P<0.05)。综上所述,随着时间增长,各组的Tarlov评分均增加,肩关节的运动功能随着时间增长逐渐好转。2、磁共振检测:术后4周,通过MRI检查发现,A组冈上肌肌腱走形区未见异常影像学信号,肌腱外形光滑;B组可见原冈上肌肌腱走形区出现明显、连续的高信号,肌腱外形不完整,可见明显的肌腱缺损;C、D、E三组可见阔筋膜移植物走形区存在高信号影,阔筋膜移植物走形褶皱,外形不光滑,E组阔筋膜移植物走形区高信号影较C、D组少,阔筋膜移植物外形较光滑,D组阔筋膜移植物走形区高信号影较E组多,但少于C组,阔筋膜移植物外形粗糙。术后8周,A组冈上肌肌腱走形区无特殊影像学信号,肌腱外观光滑流畅;E组阔筋膜移植物走形区高信号较4周时影明显减少,阔筋膜移植物外形有少许不光滑影;C、D组肌腱内可见明显高信号影,阔筋膜移植物外形欠光滑,D组高信号影较C组少,阔筋膜移植物外形少较光滑;B组可见原冈上肌肌腱走形区明显高信号影,肌腱外形不完整,仍可见肌腱缺损。3、组织学检测:(1)HE染色:术后4周时,通过显微镜观察,A、C、D、E四组标本造模界面组织生长较B组更为明显,主要表现为成纤维细胞增生,软骨细胞样细胞和纤维软骨出现,少量胶原纤维开始出现并逐渐靠近筋膜-骨界面,其中A组肩袖组织生长情况最好,其次分别是E组、D组、C组;B组标本造模界面肌腱缺损表现,可见薄膜样肉芽组织生长,未见成纤维细胞及胶原纤维,可见明显脂肪浸润,缺损处无明显愈合迹象。术后8周,A组、E组造模部位组织生长最好,可见大量成纤维细胞出现,胶原纤维明显增多并长入筋膜(腱)-骨交界处,有大量的sharpey纤维,纤维排列整齐有序,软骨细胞明显增多,新生骨量数量增加;D组成纤维细胞及胶原纤维数量较A、E组少,排列欠规则,可见少量sharpey纤维生长,可见少量新生骨出现,但多于B、C组。C组可见较多成纤维细胞及胶原纤维,排列不整齐,sharpey纤维数量偏少,新生骨较少;B组组织生长最差,可见少量脂肪浸润,部分成纤维细胞生长,胶原纤维出现,排列错乱。(2)Masoon染色:术后4周,通过显微镜观察,A、C、D、E四组造模界面组织生长愈合明显,阔筋膜移植物-骨组织间隙较小,主要表现为成纤维细胞出现,胶原纤维开始生成并靠近骨骼,数量较少的软骨细胞开始逐渐出现。A组成纤维细胞及胶原纤维数量最多,排列规则致密;E组成纤维细胞及胶原纤维数量少于A组,纤维排列相对欠规则,但多于B、C、D三组;B组标本造模界面可见少量成纤维细胞生长,未发现胶原纤维;C、D组可见少量成纤维细胞及胶原纤维生长,排列稀疏。术后8周,A组胶原纤维数量最多,排列规则致密有序;E组胶原纤维明显增多,纤维排列致密规则,但胶原纤维数量少于A组;C、D组造模部位胶原纤维数量较A、E组少,排列欠规则,胶原纤维多于B组;B组组织生长较差,可见较多成纤维细胞,少量胶原纤维生长,胶原纤维排列错乱无序。4、生物力学:术后4周时,与A组(124.9±2.25N)相比,B组(7.89±1.5N)极限负荷值明显降低(P<0.05),差异具有统计学意义,而进行干预之后E组(89.16±2.99N)、D组(85.19±1.84N)、C组(83.89±2.53N)极限负荷值均明显升高,与B组进行比较差异有统计学意义(P<0.05);但C、D、E三组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后8周,A组极限负荷(130.7±4.94N)明显高于B组(18.03±4.36N),两组间差异具有显著的统计学意义(P<0.05),进行干预之后,C组(88.01±2.69N)、D组(94.18±3.34N)、E组(108.3±4.79N)极限负荷值均明显升高,与B组比较(P<0.05),四组间差异有统计学意义;同时E组与C组比较(P<0.05),差异具有统计学意义。结论:1.自体阔筋膜是一种有效的移植物,筋膜-骨界面愈合良好。2.上关节囊重建技术在一定程度上可以加强肩关节稳定性,可成为治疗兔不可修复肩袖损伤的有效方法之一。3.局部应用GO/PRP凝胶可以促进兔阔筋膜移植物向肌腱样组织转变,进而促进筋膜-骨界面愈合,提高筋膜-骨界面的生物力学强度。
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