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摘要：建立紫外分光光度法测定澳泰乐颗粒中氢醌含量的测定方法。
关键词：澳泰乐颗粒;氢醌;含量测定;紫外分光光度法。
澳泰乐颗粒由返魂草、郁金、黄精(蒸)、白芍、麦芽5味中药组成,具有舒肝理气、清热解毒的功能。主要用于治疗甲、乙型肝炎及各种慢性肝炎,临床效果较好。而原标准中质量控制方面的内容只有君药返魂草的薄层鉴别，国家卫生部药典委员会部颁中药成方制剂第十八册中收载的澳泰乐颗粒质量标准（WS3-B-3520-98）未对含量进行有关规定。本方法采用紫外分光光度法对澳泰乐颗粒中所含的氢醌含量进行测定，从而使该品种的质量控制达到一个更为完善的水平。可作为成品质量控制指标之一,结果满意。
从澳泰乐颗粒处方看，是由返魂草等五味中药成分组成，其中返魂草为君药，占总处方量的82%，因此，我们在制定标准过程中，主要考虑返魂草的含量测定。从返魂草中查到它的主要活性成分是氢醌，它具有消炎止痛等作用，为此以氢醌为标准品，对澳泰乐颗粒进行了定量分析，从而用氢醌的含量来控制产品的质量，保证了产品的有效性和安全性。
一、测定方法如下：
1、标准曲线的绘制：
精密吸取对照品氢醌无水乙醇溶液（mg/ml）20μl、
40μl、60μl、80μl、100μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙醚-石油醚（bp30℃-60℃）（5:3）为展开剂展开，取出晾干，置碘缸中熏至斑点清晰出现时，取出，画出斑点的位置，挥尽碘后，刮取色斑置10ml具塞试管中，同时刮取相同面积的硅胶为空白，精密加入5ml无水乙醇，密塞，在超声波提取10分钟，然后进行离心（1500转/分）15分钟，取上清液，在紫外分光光度计下，在波长294nm处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，以浓度为横坐标，绘制标准曲线。
图1 可见-紫外吸收曲线图2氢醌标准曲线
2、样品的含量测定
精密称取供试品约100g，置分液漏斗中，加蒸馏水100ml，微热溶解后冷却，用乙醚萃取5次（50ml、50ml、40ml、40ml、30ml）合并萃取液，蒸干，加无水乙醇溶解至5ml量瓶中做供试品溶液。精密吸取供试品溶液80μl，对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙醚-石油醚（bp30℃-60℃）（5:3）为展开剂展开，取出，晾干，置碘缸中熏至斑点清晰出现时，画出斑点位置，挥尽碘后，刮取斑点，置10ml具塞试管中，同时刮取相同面积的硅胶作空白试验，精密加入5ml无水乙醇，密塞，超声提取10分钟，离心15分钟（1500转/分），取上清液，在294nm波长处测定吸收度，则测得数据，计算出每克中含氢醌 不少于0.02mg。
2.1 精密度试验 取供试品显色溶液重复测定 294nm处吸光度值 5 次，吸光度平均值 0.589，方法精密度良好。
2.2重现性试验 称取澳泰乐颗粒约 100g5 份、5批，精密称定，依法处理、测定 294nm 处吸光度值。以相应试剂为空白，按对照品的回归方程计算供试品中氢醌含量，平均含量为 0.0211，方法重现性良好。
2.3稳定性试验 取供试品溶液，自首次测定后放置 10min、30min、60min、90min、120min 测定吸光度值，样品显色后 2h内稳定性良好，測定结果可信。
二、起草说明
1、对标准曲线制备的说明
氢醌的标准品在乙醇中经紫外分光光度计测定最大吸收峰为294nm，当氢醌浓度在20-100μg之间，吸收度呈现良好的线性关系，当标准品为20-100μg分别点在硅胶G板上，用乙醚-石油醚（bp30℃-60℃）（5:3）为展开剂展开，取出晾干，用碘熏法显色定位，再刮取每个斑点，用乙醇为溶剂，用超声波提取，然后再离心，取上清液在294nm处测吸收度，然后绘制标准曲线，结果也是良好的线性关系。
2、对供试品测定的说明
供试品中因含大量的糖分，为定量分析带来很大困难，所以，我们采取水溶解，乙醚萃取的方法，糖不溶解乙醚，而氢醌易溶于乙醚中，从而将颗粒中的大量糖、杂质除去，且将供试品中的氢醌提取出，样品定容在5ml量瓶中，无沉淀，可供薄层点样用。
将适量的供试品溶液和标准品溶液分别点在同一硅胶G板上，用乙醚-石油醚（5:3）为展开剂，可将供试品中氢醌分离，碘熏后定位，分别刮取与标准品对应的斑点，在相同条件下，（超声，离心）测定吸收度，则测得数据进行计算出供试品中氢醌的含量。
用本法测定样品6次，结果重现性良好，经5批样品测定，最后确定每克澳泰乐颗粒含氢醌均不少于0.02mg。用这个方法来控制产品的质量，保证药品的有效性和安全性，具有一定的意义。
3、加样回收率试验（97.50%）
供试品的制备：取澳泰乐颗粒100g加水溶解后，用乙醚萃取5次（50ml、50ml、40ml、40ml、30ml）合并萃取液，蒸干，用无水乙醇溶解至5ml量瓶中，作供试品溶液，以每1ml中含氢醌1mg的无水乙醇溶液作为对照品溶液，将供试品溶液与标准品溶液点在同一硅胶G板上，用乙醚-石油醚（bp30℃-60℃）（5:3）为展开剂，可将氢醌分离，结果回收率为97.50%，证明了用此方法测定澳泰乐颗粒中的氢醌含量是切实可行的。
测定结果的有关数据附后：
澳泰乐供试品中氢醌的含量测定
试验次数 供试品量 吸收度A 吸收度平均值 平均氢醌值mg 每克供试品含氢醌mg/g
1 80μl×3次 0.590
0.595
0.585 0.590 100.0 0.0250
2 80μl×3次 0.596
0.595
0.583 0.591 98.0 0.0245
3 80μl×3次 0.595
0.588
0.585 0.589 100.5 0.0250
4 80μl×3次 0.595
0.589
0.584 0.589 99.5 0.0249
5 80μl×3次 0.564
0.556
0.563 0.561 96.0 0.0240
参考文献
[1]中华人民共和国药典委员会.澳泰乐颗粒质量标准(WS3-B-3520-98).
[2]中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典（一部）北京:中国医药科技出版社,2010.
[3]许文学，邢学锋1南方医科大学中医药学院；2 南方医科大学附属中西医结合医院
关键词：澳泰乐颗粒;氢醌;含量测定;紫外分光光度法。
澳泰乐颗粒由返魂草、郁金、黄精(蒸)、白芍、麦芽5味中药组成,具有舒肝理气、清热解毒的功能。主要用于治疗甲、乙型肝炎及各种慢性肝炎,临床效果较好。而原标准中质量控制方面的内容只有君药返魂草的薄层鉴别，国家卫生部药典委员会部颁中药成方制剂第十八册中收载的澳泰乐颗粒质量标准（WS3-B-3520-98）未对含量进行有关规定。本方法采用紫外分光光度法对澳泰乐颗粒中所含的氢醌含量进行测定，从而使该品种的质量控制达到一个更为完善的水平。可作为成品质量控制指标之一,结果满意。
从澳泰乐颗粒处方看，是由返魂草等五味中药成分组成，其中返魂草为君药，占总处方量的82%，因此，我们在制定标准过程中，主要考虑返魂草的含量测定。从返魂草中查到它的主要活性成分是氢醌，它具有消炎止痛等作用，为此以氢醌为标准品，对澳泰乐颗粒进行了定量分析，从而用氢醌的含量来控制产品的质量，保证了产品的有效性和安全性。
一、测定方法如下：
1、标准曲线的绘制：
精密吸取对照品氢醌无水乙醇溶液（mg/ml）20μl、
40μl、60μl、80μl、100μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙醚-石油醚（bp30℃-60℃）（5:3）为展开剂展开，取出晾干，置碘缸中熏至斑点清晰出现时，取出，画出斑点的位置，挥尽碘后，刮取色斑置10ml具塞试管中，同时刮取相同面积的硅胶为空白，精密加入5ml无水乙醇，密塞，在超声波提取10分钟，然后进行离心（1500转/分）15分钟，取上清液，在紫外分光光度计下，在波长294nm处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，以浓度为横坐标，绘制标准曲线。
图1 可见-紫外吸收曲线图2氢醌标准曲线
2、样品的含量测定
精密称取供试品约100g，置分液漏斗中，加蒸馏水100ml，微热溶解后冷却，用乙醚萃取5次（50ml、50ml、40ml、40ml、30ml）合并萃取液，蒸干，加无水乙醇溶解至5ml量瓶中做供试品溶液。精密吸取供试品溶液80μl，对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙醚-石油醚（bp30℃-60℃）（5:3）为展开剂展开，取出，晾干，置碘缸中熏至斑点清晰出现时，画出斑点位置，挥尽碘后，刮取斑点，置10ml具塞试管中，同时刮取相同面积的硅胶作空白试验，精密加入5ml无水乙醇，密塞，超声提取10分钟，离心15分钟（1500转/分），取上清液，在294nm波长处测定吸收度，则测得数据，计算出每克中含氢醌 不少于0.02mg。
2.1 精密度试验 取供试品显色溶液重复测定 294nm处吸光度值 5 次，吸光度平均值 0.589，方法精密度良好。
2.2重现性试验 称取澳泰乐颗粒约 100g5 份、5批，精密称定，依法处理、测定 294nm 处吸光度值。以相应试剂为空白，按对照品的回归方程计算供试品中氢醌含量，平均含量为 0.0211，方法重现性良好。
2.3稳定性试验 取供试品溶液，自首次测定后放置 10min、30min、60min、90min、120min 测定吸光度值，样品显色后 2h内稳定性良好，測定结果可信。
二、起草说明
1、对标准曲线制备的说明
氢醌的标准品在乙醇中经紫外分光光度计测定最大吸收峰为294nm，当氢醌浓度在20-100μg之间，吸收度呈现良好的线性关系，当标准品为20-100μg分别点在硅胶G板上，用乙醚-石油醚（bp30℃-60℃）（5:3）为展开剂展开，取出晾干，用碘熏法显色定位，再刮取每个斑点，用乙醇为溶剂，用超声波提取，然后再离心，取上清液在294nm处测吸收度，然后绘制标准曲线，结果也是良好的线性关系。
2、对供试品测定的说明
供试品中因含大量的糖分，为定量分析带来很大困难，所以，我们采取水溶解，乙醚萃取的方法，糖不溶解乙醚，而氢醌易溶于乙醚中，从而将颗粒中的大量糖、杂质除去，且将供试品中的氢醌提取出，样品定容在5ml量瓶中，无沉淀，可供薄层点样用。
将适量的供试品溶液和标准品溶液分别点在同一硅胶G板上，用乙醚-石油醚（5:3）为展开剂，可将供试品中氢醌分离，碘熏后定位，分别刮取与标准品对应的斑点，在相同条件下，（超声，离心）测定吸收度，则测得数据进行计算出供试品中氢醌的含量。
用本法测定样品6次，结果重现性良好，经5批样品测定，最后确定每克澳泰乐颗粒含氢醌均不少于0.02mg。用这个方法来控制产品的质量，保证药品的有效性和安全性，具有一定的意义。
3、加样回收率试验（97.50%）
供试品的制备：取澳泰乐颗粒100g加水溶解后，用乙醚萃取5次（50ml、50ml、40ml、40ml、30ml）合并萃取液，蒸干，用无水乙醇溶解至5ml量瓶中，作供试品溶液，以每1ml中含氢醌1mg的无水乙醇溶液作为对照品溶液，将供试品溶液与标准品溶液点在同一硅胶G板上，用乙醚-石油醚（bp30℃-60℃）（5:3）为展开剂，可将氢醌分离，结果回收率为97.50%，证明了用此方法测定澳泰乐颗粒中的氢醌含量是切实可行的。
测定结果的有关数据附后：
澳泰乐供试品中氢醌的含量测定
试验次数 供试品量 吸收度A 吸收度平均值 平均氢醌值mg 每克供试品含氢醌mg/g
1 80μl×3次 0.590
0.595
0.585 0.590 100.0 0.0250
2 80μl×3次 0.596
0.595
0.583 0.591 98.0 0.0245
3 80μl×3次 0.595
0.588
0.585 0.589 100.5 0.0250
4 80μl×3次 0.595
0.589
0.584 0.589 99.5 0.0249
5 80μl×3次 0.564
0.556
0.563 0.561 96.0 0.0240
参考文献
[1]中华人民共和国药典委员会.澳泰乐颗粒质量标准(WS3-B-3520-98).
[2]中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典（一部）北京:中国医药科技出版社,2010.
[3]许文学，邢学锋1南方医科大学中医药学院；2 南方医科大学附属中西医结合医院