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摘要：目的：探讨健脾祛湿针法电针对ob小鼠瘦素影响规律。方法：将18只ob/ob小鼠随机分成3组：针刺组、假针刺组、肥胖对照组，以c57小鼠作为固定组、以及空白对照组。电针治疗时电针穴位组取后三里、三阴交、中脘和关元穴。固定组、以及空白对照组、肥胖对照组不予以电针刺激，电针非穴位组选取斜肋部针刺。各组体重差及体重降低率应用spss19.0统计软件进行单因数方差分析。实验结束时，消毒小鼠眼球后，摘除小鼠眼球，取血并提取血清。采用免疫酶联法测定瘦素的含量。获得数据后应用spss19.0统计软件进行单因数方差分析其组间差异。结果：1、通过28天的治疗，电针穴位组与肥胖对照组体重增长率有显著性差异（P=0.000），说明电针能显著降低ob小鼠的生长率。2、经间单因素方差分析电针穴位组与其余各组血清中瘦素含量有显著性差异（P<0.05）。 结论：统计结果显示健脾化湿针法显著改变了ob小鼠血清中瘦素含量，针对于瘦素紊乱的肥胖有重要的干预作用。
关键词：针灸;瘦素;ob小鼠;
1 前言
肥胖（obesity）是指一定程度的明显超重与脂肪层过厚，是体内脂肪，尤其是甘油三酯积聚过多而导致的一种状态，是能量的摄入大于消耗，造成体内脂肪过度积聚或分布异常的一种慢性代谢紊乱性疾病疾病。
中医认为脾失健运，导致水湿内停是肥胖的基本病理机制，在治疗上以健脾利湿为主要原则。在中医理论的指导下，中药、针刺、穴位埋线、灸法、耳穴压豆等等方法都广泛应用于临床。而针灸以其安全、减肥作用显著、疗效持久及毒副作用小的优点已得到越来越多人的关注。针灸减肥的基本理念是以调整脾胃功能和神经内分泌为原则，通过调整体内多种活性物质及代谢途径的综合作用而达到减肥效果的[2]。即通过刺激经络腧穴来调整下丘脑—垂体—肾上腺皮质和交感—肾上腺髓质两大系统功能，加快基础代谢率，由此提高脂肪循环，产生热量，使积存的脂肪消耗掉，进而调整、完善、改善人体自身平衡[3]。
2材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1主要实验仪器和试剂
G6805-2电针治疗仪：上海医用电子仪器厂
台式离心机：德国Heraeus
电子天平：YP1201N型，上海精密科学仪器有限公司
电热恒温水浴箱：六一厂
0.5寸无菌针灸针：天津华鸿医材有限公司
全自动生化分析仪：日立7170
瘦素测定试剂盒（免疫酶联法）
2.1.2 实验动物
采用4周龄的健康雄性ob小鼠， 18只。4周龄的健康雄性c57小鼠12只，spf级，（购于卡文斯）。
2.2 方法
2.2.1分组及肥胖小鼠模型的建立
均适应性喂养普通饲料（SFP级鼠饲料）1周后，随机分组并进行针刺干预。体重变化标准的判定：以体重增长率低于同期正常组平均增长率的2个标准差为减肥显效标准。
2.2.2电针治疗
参照文献[5-10]相关描述，取后三里、 三阴交、中脘和关元穴。针刺干预时将小鼠捆绑于自制的固定器上，剪去待刺穴位的鼠毛。75%酒精消毒后，用无菌0.5寸针灸针，针刺一侧足三里、三阴交及关元穴。操作时觉针下沉紧得气后，接通G6805-2电针治疗仪，采用频率为10Hz，强度为1.5 V的连续波，以肢体微动且动物能保持安静不挣扎嘶叫为度。10 min后停针，每日治疗1次，左右侧轮换取穴。针刺组治疗的同时，假针刺组除选取针刺位点不同，其他处理同针刺组。固定组除不针刺外，其它处理同针刺组。在治疗期间，所有动物均用普通饲料喂养，自由摄食、饮水。
2.2.3 取材与检测实验结束时，消毒小鼠眼球后，用手术嵌摘除眼球，将血液装于灭菌1.5mlEP管中，即刻提取血清。提取血清后进行elisa测定瘦素含量。
2.2.5血清生化分析
3结果
3.1电针对体重增长率的影响
14d小鼠体重增长率出现差异，由于外界干预和自身体质不同各组差异开始明显。与临床常用14d为一个疗程治疗相符。
表1电针对体重的影响
表1显示：治疗开始前，ob小鼠生长率与正常c57小鼠组体重生长率比较有显著差异（P<0.05），而ob小鼠各组之间生长率差异无显著性（P值均大于0.05）。电针14天针刺穴位组与肥胖组14天时的体重增长率相比较差异显著（P<0.05），与c57空白对照组有显著差异（P<0.05），假针刺组与肥胖组无差异（P>0.05）且均与对照组有差异（P<0.05）。21d针刺穴位组与肥胖组的体重增长率相比较差异不显著（P>0.05），与c57空白对照组有显著差异（P<0.05），假针刺组与针刺组、肥胖组无差异（P>0.05）且均与对照组有差异（P<0.05）。
3.2电针对瘦素的影响
表2电针对瘦素的影响
表2显示：21d后，针刺组ob小鼠瘦素与正常c57小鼠瘦素比较无显著差异（P>0.05），而与假针刺组肥胖组均有差异（P<0.05）
4讨论
4.1电针对体重增长率影响
将实验所得数据经统计软件spss19.0通过14天的治疗，电针治疗组与肥胖组体重增长率有显著性差异（P<0.05），说明健脾祛湿针法能显著缓解ob小鼠增长情况。对于肥胖鼠体重减轻的可能原因有1、电针刺激足三里、三阴交和关元穴促使小肠运动频率增加，增强胆固醇的分解和排泄，调节胃肠蠕动和消化液的分泌，减少小肠对营养物质的过度吸收，加快代谢废物的排泄[5-10]。2、针灸减肥过程可能，通过对肠道菌群数量或酶类表达进行调节来达到减肥的作[11-12]。当然也不排除是以上两种原因共同作用。干预21d后针刺穴位组与肥胖组的体重增长率相比较差异不显著（P>0.05），与c57空白对照组有显著差异（P<0.05），假针刺组与针刺穴位组、肥胖组无差异（P>0.05）且均与对照组有差异（P<0.05）。其可能原因1、肥胖小鼠在21d对针刺耐受。2、小鼠达到8周龄其体重进入稳定增长期对于外界干预不敏感。 4.2 瘦素差异的可能原因分析
spss19.0分析针刺组ob小鼠瘦素与正常c57小鼠瘦素比较无显著差异（P>0.05），而与假针刺组肥胖组均有差异（P<0.05）这一结果反映了健脾化湿穴位的针刺可以有效的改善与肥胖相关基因leptin的表达，可以在一定范围类减缓瘦素基因缺失的肥胖发病进程。
综上健脾祛湿针法对ob小鼠的瘦素在血清内的含量有一定的良性调控作用，并为我们研究针灸配穴对相关疾病基因调控提供了一定的数据支持。
参考文献：
[1]沈立力，宁友，熊芳丽.中医治疗单纯性肥胖症的概述[J].贵阳中医学院学报，2010， （1）：75-78.
[2]林宏.针灸减肥概况[J]中华中医药杂志，2003，（18）：173-176.
[3]戴景.中医针灸减肥[J]包头医学，2011，35（4）：231-232.
[4]孙志，张中成，刘志诚.营养性肥胖动物模型的实验研究[J].中国药理学通报， 2002，18（4）：466-467.
[5]余曙光，郭义.实验针灸学[M].上海：上海科技出版社，2009：149
[6] Choi M， Jung J， Seo M， et al. Ultrasonographic observation of intestinal mobility of dogs after acupunctural stimulation on acupoints st-36 and bl-27[J].J Vet Sci ，2001，2（3）： 221-226.
[7]陈兰，刘诗.高频电针刺激足三里穴对大鼠结肠传输功能的影响[J]. 胃肠病学和肝病学杂志，2007， 16（5）： 477-480.
[8]李艳芬，庄礼兴，朱晓平.穴位埋线治疗高脂血症的临床研究[J].辽宁中医杂志，2011，38（1）：142-146.
[9]Tabosa A， Yamamura Y， Forno ER， etal. A comparative study of the effects of electroacupuncture and moxibustion in the gastrointestinal motility of the rat[J]. Dig Dis Sci，2004，49（4）：602-610.
[10]侯玉铎.腹部腧穴在针灸减肥中的应用[J].中国药物与临床，2011，11（9）：1103-1104.
[11]Gill SR， Pop M， Deboy RT， et al. Metagenomic analysis of the human distal gut micro- biome[J] .Science ，2006，312（5778）：1355-1359.
[12]周莉萍，针灸治疗单纯性肥胖的肠道菌群调节机理探讨[D].成都中医药大学，2011
[13]崔明霞，高琲，闵光宁，等.造模持续时间对大鼠高营养性肥胖模型制备的影响[M]中国药理学通报，2008，24（ 3）： 412～ 6
关键词：针灸;瘦素;ob小鼠;
1 前言
肥胖（obesity）是指一定程度的明显超重与脂肪层过厚，是体内脂肪，尤其是甘油三酯积聚过多而导致的一种状态，是能量的摄入大于消耗，造成体内脂肪过度积聚或分布异常的一种慢性代谢紊乱性疾病疾病。
中医认为脾失健运，导致水湿内停是肥胖的基本病理机制，在治疗上以健脾利湿为主要原则。在中医理论的指导下，中药、针刺、穴位埋线、灸法、耳穴压豆等等方法都广泛应用于临床。而针灸以其安全、减肥作用显著、疗效持久及毒副作用小的优点已得到越来越多人的关注。针灸减肥的基本理念是以调整脾胃功能和神经内分泌为原则，通过调整体内多种活性物质及代谢途径的综合作用而达到减肥效果的[2]。即通过刺激经络腧穴来调整下丘脑—垂体—肾上腺皮质和交感—肾上腺髓质两大系统功能，加快基础代谢率，由此提高脂肪循环，产生热量，使积存的脂肪消耗掉，进而调整、完善、改善人体自身平衡[3]。
2材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1主要实验仪器和试剂
G6805-2电针治疗仪：上海医用电子仪器厂
台式离心机：德国Heraeus
电子天平：YP1201N型，上海精密科学仪器有限公司
电热恒温水浴箱：六一厂
0.5寸无菌针灸针：天津华鸿医材有限公司
全自动生化分析仪：日立7170
瘦素测定试剂盒（免疫酶联法）
2.1.2 实验动物
采用4周龄的健康雄性ob小鼠， 18只。4周龄的健康雄性c57小鼠12只，spf级，（购于卡文斯）。
2.2 方法
2.2.1分组及肥胖小鼠模型的建立
均适应性喂养普通饲料（SFP级鼠饲料）1周后，随机分组并进行针刺干预。体重变化标准的判定：以体重增长率低于同期正常组平均增长率的2个标准差为减肥显效标准。
2.2.2电针治疗
参照文献[5-10]相关描述，取后三里、 三阴交、中脘和关元穴。针刺干预时将小鼠捆绑于自制的固定器上，剪去待刺穴位的鼠毛。75%酒精消毒后，用无菌0.5寸针灸针，针刺一侧足三里、三阴交及关元穴。操作时觉针下沉紧得气后，接通G6805-2电针治疗仪，采用频率为10Hz，强度为1.5 V的连续波，以肢体微动且动物能保持安静不挣扎嘶叫为度。10 min后停针，每日治疗1次，左右侧轮换取穴。针刺组治疗的同时，假针刺组除选取针刺位点不同，其他处理同针刺组。固定组除不针刺外，其它处理同针刺组。在治疗期间，所有动物均用普通饲料喂养，自由摄食、饮水。
2.2.3 取材与检测实验结束时，消毒小鼠眼球后，用手术嵌摘除眼球，将血液装于灭菌1.5mlEP管中，即刻提取血清。提取血清后进行elisa测定瘦素含量。
2.2.5血清生化分析
3结果
3.1电针对体重增长率的影响
14d小鼠体重增长率出现差异，由于外界干预和自身体质不同各组差异开始明显。与临床常用14d为一个疗程治疗相符。
表1电针对体重的影响
表1显示：治疗开始前，ob小鼠生长率与正常c57小鼠组体重生长率比较有显著差异（P<0.05），而ob小鼠各组之间生长率差异无显著性（P值均大于0.05）。电针14天针刺穴位组与肥胖组14天时的体重增长率相比较差异显著（P<0.05），与c57空白对照组有显著差异（P<0.05），假针刺组与肥胖组无差异（P>0.05）且均与对照组有差异（P<0.05）。21d针刺穴位组与肥胖组的体重增长率相比较差异不显著（P>0.05），与c57空白对照组有显著差异（P<0.05），假针刺组与针刺组、肥胖组无差异（P>0.05）且均与对照组有差异（P<0.05）。
3.2电针对瘦素的影响
表2电针对瘦素的影响
表2显示：21d后，针刺组ob小鼠瘦素与正常c57小鼠瘦素比较无显著差异（P>0.05），而与假针刺组肥胖组均有差异（P<0.05）
4讨论
4.1电针对体重增长率影响
将实验所得数据经统计软件spss19.0通过14天的治疗，电针治疗组与肥胖组体重增长率有显著性差异（P<0.05），说明健脾祛湿针法能显著缓解ob小鼠增长情况。对于肥胖鼠体重减轻的可能原因有1、电针刺激足三里、三阴交和关元穴促使小肠运动频率增加，增强胆固醇的分解和排泄，调节胃肠蠕动和消化液的分泌，减少小肠对营养物质的过度吸收，加快代谢废物的排泄[5-10]。2、针灸减肥过程可能，通过对肠道菌群数量或酶类表达进行调节来达到减肥的作[11-12]。当然也不排除是以上两种原因共同作用。干预21d后针刺穴位组与肥胖组的体重增长率相比较差异不显著（P>0.05），与c57空白对照组有显著差异（P<0.05），假针刺组与针刺穴位组、肥胖组无差异（P>0.05）且均与对照组有差异（P<0.05）。其可能原因1、肥胖小鼠在21d对针刺耐受。2、小鼠达到8周龄其体重进入稳定增长期对于外界干预不敏感。 4.2 瘦素差异的可能原因分析
spss19.0分析针刺组ob小鼠瘦素与正常c57小鼠瘦素比较无显著差异（P>0.05），而与假针刺组肥胖组均有差异（P<0.05）这一结果反映了健脾化湿穴位的针刺可以有效的改善与肥胖相关基因leptin的表达，可以在一定范围类减缓瘦素基因缺失的肥胖发病进程。
综上健脾祛湿针法对ob小鼠的瘦素在血清内的含量有一定的良性调控作用，并为我们研究针灸配穴对相关疾病基因调控提供了一定的数据支持。
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[8]李艳芬，庄礼兴，朱晓平.穴位埋线治疗高脂血症的临床研究[J].辽宁中医杂志，2011，38（1）：142-146.
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[13]崔明霞，高琲，闵光宁，等.造模持续时间对大鼠高营养性肥胖模型制备的影响[M]中国药理学通报，2008，24（ 3）： 412～ 6