肿瘤是严重威胁人类生命健康的一类疾病,手术、化疗、放疗等治疗肿瘤性疾病的方法对机体的损伤作用很大,近些年来各国研究学者对毒副作用小、活性作用广泛且具有抗肿瘤作用的天然药物给予了极大的关注。紫杉醇是一种具有抗肿瘤活性的天然药物,作为20世纪末开发出来的抗癌药物,现已经普遍应用在人卵巢癌、乳腺癌、非小细胞肺癌及黑色素瘤的临床治疗中,其突出的疗效更是引起人们的广泛注意,但是紫杉醇作用于肿瘤细胞,诱发其凋亡的作用机制目前还没有一个完善的解释,本实验就此问题进行了一系列的研究。实验采用体外培养的犬乳腺肿瘤细胞为研究对象,经浓度分别为0nmol/L、4nmol/L、8nmol/L、16nmol/L的紫杉醇处理后,分别于作用后24h、48h、72h时,采用BrdU荧光标记法观察肿瘤细胞的凋亡情况;通过MTT比色法测定肿瘤细胞的生长抑制率;应用试剂盒比色法检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、Caspase-3酶、Caspase-6酶的活性以及钙离子的浓度;应用放射免疫法对犬乳腺肿瘤细胞上清液中的细胞因子的含量进行测定,进而探讨紫杉醇抗肿瘤细胞增殖作用的相关机制。通过BrdU标记载玻片细胞增殖荧光显微镜法观察细胞增殖状态,从形态学角度分析紫杉醇对犬乳腺肿瘤细胞增殖的抑制情况。实验结果表明犬乳腺肿瘤细胞对紫杉醇高度敏感,其抑制程度呈明显的剂量时间依赖性。实验通过对葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的活性的测定,实验组葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的活性随时间和紫杉醇浓度的增加逐渐降低,与对照组比较,差异明显。表明紫杉醇是通过破坏细胞膜的完整性,进而影响DNA和RNA的合成,从而抑制犬乳腺肿瘤细胞的生长、增殖。犬乳腺肿瘤细胞中Caspase-3酶活性、Caspase-6酶活性、钙离子浓度、细胞色素C的含量实验组明显高于对照组,表明紫杉醇可能是通过激活细胞凋亡通路来促使犬乳腺肿瘤细胞凋亡,从而达到抑制犬乳腺肿瘤细胞增殖的目的。本研究首次发现紫杉醇能够使体外培养的犬乳腺肿瘤细胞分泌的细胞因子白细胞介素-1、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)以及肿瘤坏死因子(TNF-α)含量增高,此结果可能是引起犬乳腺肿瘤细胞增殖受到抑制的原因和机理之一。