【摘 要】
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目的:探究Hippo信号通路核心蛋白在丙戊酸钠（Valproic acid,VPA）孤独症小鼠出生后脑发育中所产生的作用以及作用机制。方法:将成年C57BL/6小鼠雌雄2:1合笼24小时后,观察阴栓,见阴栓后记为E（Embryonic,E）1天,将雌鼠分笼单独饲养。将受孕雌鼠随机分两组,一组在E12.5天腹腔注射0.6mg/g的VPA（由0.9%NaCl溶液配制）为实验组,一组在E12.5天腹腔注
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目的:探究Hippo信号通路核心蛋白在丙戊酸钠（Valproic acid,VPA）孤独症小鼠出生后脑发育中所产生的作用以及作用机制。方法:将成年C57BL/6小鼠雌雄2:1合笼24小时后,观察阴栓,见阴栓后记为E（Embryonic,E）1天,将雌鼠分笼单独饲养。将受孕雌鼠随机分两组,一组在E12.5天腹腔注射0.6mg/g的VPA（由0.9%NaCl溶液配制）为实验组,一组在E12.5天腹腔注射等量的0.9%NaCl溶液为对照组。实验组雌鼠产下的子一代为VPA孤独症小鼠;对照组雌鼠产下的子一代记为正常对照组。以出生后（postnatal,P）3天、6天、9天为出生后早期,8周为成熟期。在这四个时间点取材。每组取四只小鼠提取前额叶蛋白,通过蛋白免疫印迹检测小鼠前额叶中Hippo信号通路核心蛋白MST1、LATS1、P-YAP-S127、YAP的表达;三只小鼠灌流取脑冰冻切片,通过免疫荧光对小鼠前额叶次级运动皮层（secondary motor cortex,M2）中小胶质细胞及神经元细胞和海马齿状回（dentate gyrus,DG）中新生神经元细胞进行计数,并对YAP在小胶质细胞、神经元细胞和新生神经元细胞中的分布情况进行定位分析。结果:蛋白免疫印迹结果显示,VPA孤独症小鼠Hippo信号通路核心蛋白LATS1、MST1、P-YAP-S127随着鼠龄增加表达减少;YAP在出生后早期无显著差异,在成熟期表达显著降低;与对照组相比VPA孤独症小鼠出生后早期Hippo信号通路核心蛋白LATS1、MST1、P-YAP-S127表达增高,而成熟期Hippo信号通路核心蛋白LATS1、MST1、P-YAP-S127表达无显著差异;VPA孤独症小鼠YAP蛋白表达无显著差异。免疫荧光结果对照组相比:VPA孤独症小鼠小胶质细胞数目增加,细胞核内YAP百分比在P3d、P6d时增多,在P9d、P8w时无显著差异;前额叶M2区神经元细胞数目减少,细胞核内YAP百分比增多;DG区新生神经元数目在P6d时增多,P9d时减少;与之相伴随的是P3d时,新生神经元核内YAP百分比减少,而P6d、P9d时,新生神经元核内YAP百分比增多,P8w时无显著差异。结论:（1）Hippo信号通路可抑制VPA孤独症小鼠出生后早期小胶质细胞再殖;（2）Hippo信号通路通过调控VPA孤独症小鼠新生神经元的数目来调整神经元的数目。
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