【摘 要】
：
目的:检测microRNA-200c-3p（miR-200c-3p）在肾癌细胞株中的表达,并探索其对肾癌细胞株的增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响。探索miR-200c-3p能否能通过调控ZEB2（zinc finger E-box-binding homeobox2）影响肾癌细胞上皮间质转化过程。方法:（1）通过实时定量PCR检测人胚胎肾细胞293T、人肾上腺皮质小细胞癌细胞SW3、人肾癌细胞株A
论文部分内容阅读
目的:检测microRNA-200c-3p（miR-200c-3p）在肾癌细胞株中的表达,并探索其对肾癌细胞株的增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响。探索miR-200c-3p能否能通过调控ZEB2（zinc finger E-box-binding homeobox2）影响肾癌细胞上皮间质转化过程。方法:（1）通过实时定量PCR检测人胚胎肾细胞293T、人肾上腺皮质小细胞癌细胞SW3、人肾癌细胞株ACHN及786-O中miR-200c-3p的表达情况。（2）分四组进行实验,为Blank组、miR-200c-3pmimics组、miR-200c-3pinhibitor组、NC组,分别转染ACHN及786-O细胞,检测细胞转染后miR-200c-3p的表达水平。（3）MTT法检测miR-200c-3p对肾癌细胞增殖的影响,流式细胞术检测肾癌细胞凋亡率。（4）Transwell实验检测miR-200c-3p对肾癌细胞侵袭和迁移能力的影响。（5）使用生物信息学软件预测miR-200c-3p的靶基因为ZEB2,用Western Blot检测ZEB2蛋白及EMT通路相关蛋白的表达情况。结果:（1）miR-200c-3p在在人肾癌细胞株ACHN及786-O中表达水平明显降低,与人胚胎肾细胞293T相比,差异均具有明显统计学意义（P0.05）。（3）在ACHN及786-O肾癌细胞中,与对照组NC组相比,miR-200c-3pmimics组在转染后第24小时出现生长抑制情况,并随着时间延长,生长抑制现象持续增加,到第72小时后miR-200c-3p mimics组细胞增殖被明显抑制,差异均具有统计学意义（P0.05）。（4）在786-O肾癌细胞中miR-200c-3pmimics组的早期细胞凋亡率为23.52%,明显高于Blank组（6.21%）、miR-200c-3pinhibitor组（2.96%）、NC组（9.78%）;miR-200c-3pmimics组的晚期细胞凋亡率为10.45%,高于miR-200c-3pinhibitor组（4.2%）、NC组（7.81%）。而在另外一种肾癌细胞ACHN中也出现了同样的现象,miR-200c-3pmimics组的早期细胞凋亡率、晚期细胞凋亡率（15.21%、13.01%）高于Blank组（2.36%、4.82%）、miR-200c-3pinhibitor组（2.48%、3.34%）、NC组（3.78%、3.61%）。（5）与对照组NC组相比,miR-200c-3pmimics组肾癌细胞穿过Transwell小室的细胞数目显著减少,侵袭和迁移能力均降低（P<0.01、P<0.01、）;miR-200c-3pinhibitor组肾癌细胞穿过Transwell小室的细胞数目显著增多,侵袭和迁移能力均增强（P<0.01、P0.05）。（6）Western Blot结果表明,和NC组、Blank组相比,miR-200c-3pmimics组ZEB2表达量明显降低（P<0.01）,同时E-钙粘蛋白表达量增高、纤连蛋白的表达量降低（P<0.01、P<0.01）。结论:1.miR-200c-3p在肾癌细胞ACHN、786-O中低表达,miR-200c-3p在肾癌细胞中可能作为抑癌基因发挥作用。2.miR-200c-3p在肾癌细胞的生物学功能中起着调控作用,过表达miR-200c-3p能抑制肾癌细胞的增殖,促进肾癌细胞凋亡,并减弱侵袭、迁移能力。3.miR-200c-3p可能通过调控ZEB2的表达影响肾癌细胞EMT过程。本研究结论提示miR-200c-3p在肾癌细胞的生物学功能中起着调控作用,可能是影响肾癌细胞侵袭、迁移、凋亡等功能的关键miRNA之一,有望成为肾癌的诊断及治疗中的重要靶点。
其他文献
目的:评价术前经胸超声心动图（transthoracic echocardiogram,TTE）在择期行腹腔镜下结直肠癌手术患者麻醉前评估中的临床意义。方法:本研究采用单中心回顾性分析方法,纳入了2018年1月至2018年12月期间入院,1049例于福建医科大学附属协和医院择期行腹腔镜下结直肠手术治疗的成年患者。纳入的研究对象包括967例术前行TTE检查的患者及82例术前未行TTE检查的患者。收集
【目的】神经炎症反应是许多神经系统疾病的重要病理基础,活化的小胶质细胞（Microglia,MG）是神经炎症最重要的细胞成分之一,它通过分泌多种细胞因子与神经元细胞和其他中枢神经胶质细胞相互作用。本研究试图识别与小胶质细胞活化机制相关的基因模块,并利用生物信息学寻找相关药物。【方法】我们从NCBI-Gene Expression Omnibus（GEO）数据库下载了6个芯片数据集（GSE18740
目的研究不同分子亚型I、II期乳腺癌中新辅助化疗的趋势,探讨分子亚型、临床分期以及诊断年份对新辅助化疗的影响。方法利用美国国家癌症数据库（National Cancer Database,NCDB）筛选出2010年1月至2014年12月I期和II期可手术乳腺癌患者进行回顾性分析。纳入的变量有:年龄、种族、诊断年份、分子亚型、肿瘤大小、淋巴结状态、组织学类型、组织学分级、Charlson/Deyo评
目的:探讨骨折端局部注射高聚金葡素对大鼠新鲜骨折愈合的影响。方法:本实验采用健康6月龄SD雌性大鼠60只,随机分为A、B、C组（每组20只）共3组:正常对照组（A组）,生理盐水注射骨折端组（B组）和金葡素注射骨折端组（C组）。各组大鼠适应性喂养1周后,通过手术方式建立新鲜骨折模型。建模后,C组大鼠在术后第1周起每周骨折端局部注射金葡素0.1ml,B组同时期进行骨折端注射等量生理盐水,A组不予处理。
目的我国结肠癌发病率逐年增高。早期发现结肠癌或结肠癌的癌前病变,对改善患者的生命健康质量,有极大意义。结肠腺瘤性息肉（Colorectal Adenoma,CRA）是结肠癌的癌前病变。非酒精性脂肪肝（Nonalcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD）的发病率同样呈增高趋势。本文旨在探讨结肠腺瘤性息肉发病率、发病机制及其临床特点与NAFLD的相关性。方法选择福建省老年医院
[目的]了解原发性肝癌患者术前营养状况的评估价值以及低骨骼肌质量对术后的影响,探讨肌肉减少症对术后并发症发生的预测作用。[方法]回顾分析福建医科大学附属泉州第一医院2013年7月-2018年6月符合纳入标准的原发性肝癌患者总计110例。根据测量患者CT腰3（L3）椎体层面骨骼肌中腰大肌面积（cm~2）和密度值（hounsfield单位）,将其标化后生成性别特异性四分位数,每个方法中最低的25%符合
目的对胃癌患者围手术期各项资料进行分析,探讨腹腔镜辅助胃癌根治术（LARG）后吻合口并发症发生的相关危险因素,以提出相应的预防措施,为临床实践做一些参考。方法收集2013年01月至2019年06月期间在联勤保障部队第九〇〇医院普通外科行腹腔镜辅助胃癌根治术的691例胃癌患者的围手术期资料:（1）术前情况资料;（2）手术方式、消化道吻合方式、吻合技术等术中资料;（3）切除标本的病理资料;（4）术后情
目的:探讨智力障碍/全面发育迟缓伴癫痫（ID/GDD-EP）患儿的遗传学病因,为临床诊疗及遗传咨询提供依据。方法:（1）选取2015年1月至2018年12月在我院就诊的ID/GDD-EP患儿为研究对象,详细记录患儿的临床资料,完善临床常规检查。（2）对临床资料进行分析,首先选择对患儿行常规染色体核型分析,阴性者采用单核苷酸多态性微阵列芯片技术（SNP array）进行基因组拷贝数变异（CNV）检测
目的:从血清脂质谱和基因多态性的角度,探讨首发急性缺血性脑卒中患者发生早期神经功能恶化的预测指标。方法:收集2017年6月至2018年12月在厦门大学附属第一医院神经内科就诊的首发急性缺血性脑卒中患者414例。根据是否发生早期神经功能恶化分为病例组110例,对照组304例。早期神经功能恶化定义为急性缺血性脑卒中患者发病1周内出现新发的神经功能障碍或明显的神经功能恶化。收集所有纳入患者的临床数据和实
目的:检测通过经临床症状,影像学,神经电生理,术中导航技术及术后病理回报确诊的颅内海绵状血管瘤（Cerebral Cavernous Malformations,CCM）并发癫痫的病灶及癫痫灶组织的RIP1,RIP3,MLKL、Rh OA的表达及分布情况和表达意义。方法:1.选择自2012年01月至2019年09月经临床症状,影像学,术中导航技术及手术确认,术中皮层脑电图检测（Intraopera