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胶原蛋白是一种集保健营养于一身的优质产品,它存在广泛,尤其是在动物的结缔组织中。例如牛在屠宰加工时,产生了大量的副产物及废弃物,其中骨,内脏等占有较大的比例,而在骨和内脏中又含有了丰富的营养物质,其中胶原蛋白就是之一。因此,深入研究屠宰加工过程中产生的副产物及废弃物,使它们变废为宝,为胶原蛋白的提取寻求了新的来源。本试验主要为胶原蛋白的提取寻求了一个新的原料——牛肺管这一副产物,测定了其营养成分：牛肺管中水分含量为65.62%、蛋白质含量为20.83%、脂肪含量为9.10%、胶原蛋白的含量为18.81%±0.12、Mg341.90mg/Kg、 Al15.11mg/Kg、Ca1197.27mg/Kg、Fe46.98mg/Kg、 Cu0.75mg/Kg、Zn8.16mg/Kg。并且牛肺管中含有大量的胶原蛋白,其含量为18.81%±0.12。分别应用了不同的酶提取胶原蛋白,通过对酶反应条件的正交试验和响应面优化,选择出了提取胶原蛋白所用的酶的种类及最优的提取条件：碱性蛋白酶的pH8.70、底物浓度7%、加酶量(E/S)2.0%、酶解温度34.86℃、酶解时间24.28h。为了获得高纯度,高提取率,酶法提取胶原蛋白之前进行了脱脂、脱蛋白、脱钙处理：用质量分数为6%碳酸钠作为脱脂液,以料液比为1：20条件下浸泡12h,将脱完脂的原料进一步用2mol/L氯化钠浸泡脱蛋白,脱钙时选取了EDTA溶液,经过正交分析得出最优的脱钙条件,EDTA浓度为0.20mol/L,脱钙时间36h,料液比1：20。脱钙率为91.73%。采用DEAE-52离子交换色谱的方法将牛肺管胶原蛋白胶原与蛋白多糖来分离。分离出来的胶原蛋白经过SDS-PAGE电泳及紫外光谱试验结果表明：经过离子交换色谱柱收集到的胶原蛋白与Sigma公司的标准胶原蛋白所具有的电泳带在同一水平线上,并且无杂带出现,同时,进一步经过紫外分光光度法测定其吸光度发现在227nm下有强吸收峰,250-290nm基本无吸收峰,由此可以证明出所纯化的胶原蛋白纯度较高。本试验对所提取的胶原蛋白进行了氨基酸成分分析,所得到的氨基酸组成及各个氨基酸所占比例,甘氨酸的含量30.86%,占了氨基酸总量的1/3,脯氨酸和丙氨酸的含量分别是10.45%和10.2%,含量相对较高。羟脯氨酸这种独特的氨基酸含量也达到了11.67%,含量很高,符合胶原蛋白的特征。与sigma公司的Ⅱ型标准样品做了相应的比较,最终得出二者的组成相似。纯度较高,属于Ⅱ型胶原蛋白。