目的:糖尿病肾脏疾病（diabetic kidney disease,DKD）是一种糖尿病重要的并发症,是糖尿病死亡率的主要原因,同时是导致终末期肾脏疾病（end stage renal disease,ESRD）的最常见原因。尽管DKD是以肾小球病变为主,但是肾小管损伤在DKD早期就已出现。其中,补体系统激活及线粒体功能的失调被证实是DKD的发生及进展中的重要机制,且补体系统的激活与线粒体稳态关系密切。C3a是补体系统激活后产生的活性产物,可参与肾小管损伤,但其对人肾皮质近曲小管上皮细胞（human renal proximal tubular epithelial cell line,HK-2细胞）线粒体损伤尚不明确。本研究旨在观察在高糖环境下,C3a通过C3a受体（C3a receptor,C3aR）介导HK-2细胞线粒体损伤,进一步补充C3a参与DKD肾小管损伤的机制。方法:体外培养HK-2细胞,以5.5、10、15、20、25 mmol/L葡萄糖及甘露醇干预HK-2细胞24 h、48 h、72 h、96 h,采用酶联免疫吸附试验法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）、q PCR法、Western Blot法检测HK-2细胞的C3a、C3及C3aR的mRNA水平和蛋白水平。在排除高渗透压因素的情况下,选取HK-2细胞分泌C3a最多的葡萄糖浓度和作用时间作为后续的刺激条件。在高糖环境下（即25 mmol/L葡萄糖干预48 h）,采用q PCR法、Western Blot法检测HK-2细胞线粒体融合蛋白1（Mitofusin1,Mfn1）、动力相关蛋白1（Dynamin-related protein1,Drp1）的mRNA水平和蛋白水平、化学发光法检测线粒体腺苷三磷酸（adenosine triphosphate,ATP）产量、荧光显微镜观察线粒体活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平及透射电子显微镜观察线粒体形态。在高糖环境下,给予外源性的C3a(10-7mol/L)及SB290157(10-6mol/L,阻断C3aR)刺激HK-2细胞后,观察上述的线粒体指标变化。结果:1.随着葡萄糖浓度的增加,HK-2细胞自分泌的C3a水平升高,当葡萄糖浓度达到25 mmol/L且干预时间为48 h时达到高峰;在高糖环境下,C3及C3aR的mRNA和蛋白表达水平均升高。2.在高糖环境下,Mfn1的mRNA和蛋白表达水平均下降、Drp1的mRNA和蛋白表达水平均升高、ATP产量下降、线粒体活性氧水平升高、线粒体形态结构发生改变。3.在高糖环境下,外源性C3a诱导线粒体的Mfn1水平更低、Drp1水平更高、ATP产量更低、线粒体活性氧水平更高、线粒体受损更严重;给予SB290157阻断C3aR后,上述情况得到改善。结论:1.在葡萄糖的刺激下,体外培养的HK-2细胞C3a分泌增多,C3aR表达增加。2.在高糖环境下,HK-2细胞线粒体的稳态失衡及部分功能受损。3.在高糖环境下,C3a-C3aR参与HK-2细胞线粒体的稳态失衡及部分功能损伤。阻断C3aR后HK-2细胞线粒体的稳态及功能得到改善。