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鸡球虫病是一种感染鸡的传染性的、致死性的寄生虫病。其病原主要为艾美尔属（Eimeria）的7种球虫，其中以柔嫩艾美尔球虫（E.tenella）的致病力最强。近年来，随着鸡球虫病免疫机制研究的深入，T细胞介导的细胞免疫被认为具有保护作用。本研究以淋巴细胞转化为判定指标，从E.tenella孢子化卵囊可溶性抗原中鉴定了其中的T细胞刺激性抗原。实验共分3个部分。1.E.tenella可溶性抗原的制备E.tenella感染鸡盲肠内容物经胰蛋白酶消化、饱和盐水漂浮而提取的球虫卵囊纯度高，孢子化完全，被污染的程度低；纯化的孢子化的卵囊用超声波裂解，功率设置为200W、工作时间5秒、间隙时间5秒、工作次数60次，3个循环。裂解产物经TritonX-100作用24hr,4℃高速离心，上清即为E.tenella可溶性抗原。2.E.tenella可溶性抗原对球虫耐过鸡脾脏、盲肠扁桃体淋巴细胞的刺激效果应用MTT比色法检测了E.tenella可溶性抗原对球虫耐过鸡淋巴细胞的刺激效果。实验结果表明，E.tenella可溶性抗原能够刺激球虫耐过鸡T淋巴细胞增殖，从E.tenella可溶性抗原中筛选T细胞刺激性抗原是可能的；且通过本实验结果把淋巴细胞浓度为5.0×10~6/ml、抗原浓度为20ug/ml、培养时间为96hr作为淋转的最佳条件。3.T细胞刺激性抗原的筛选以淋巴细胞转化为判定指标筛选了E.tenella可溶性抗原中的T细胞刺激性抗原。E.tenella可溶性抗原用SephadexG-200柱层析，获得四个峰，以MTT比色法检测了四个峰蛋白（命名为1.0蛋白、2.0蛋白、3.0蛋白和4.0蛋白）对球虫耐过鸡T淋巴细胞（脾脏和盲肠扁桃体）的刺激强度，结果显示，3.0蛋白比其它组分蛋白及RMPI1640阴性对照组的刺激作 焦永军：柔嫩艾美尔球虫T淋巴细胞刺激性抗原的研究用强，但不如 C。nA阳性对照组（平均 OD值：ODMhd．54，OD山d．39，OD。1。o．37，OD IO fAed．33，OD4。t。l．30，tjD。＃．u。d．61，OD。tiNed．30）。体内试验表明，3．0蛋白在盲肠病变计分（Meanllb MCLMCLs）、增重差异和卵囊记数p吵卿s er o OPG）三项指标上均反映出比对照组高的保护力。3．0蛋白再用Se呻xGJ5进行柱层析，获得三个峰（命名为3＊蛋白、3．2蛋白和3．3蛋白），以同样的方法检测了其对球虫耐过鸡T细胞的刺激效果，结果显示3．2蛋白对球虫耐过鸡T细胞的刺激效果均优于除C。nA阳性对照组外的其它组（平均OD值：OD 33。千刀＊6，0厂。l。edwl．2吕，OD；。。j刀卫2，＊刀3。，矿吻卉6，OD。。阴司j2，OD。。明刀二0）。在S＊8f见GE上3．2蛋白显示为分子量为37KD和40KD的两条带。最后，以盲肠病变计分、增重差异两项指标评价了3二蛋白在体内的保护力，结果表明在此两项指标上3．2蛋白的免疫保护力均比其它蛋白组分和阴性对照组为高（MCLS3．2酌叫．5，MCLS。。。。－2．14，MCLS。。。＝3＊2，MCLS。Mt3．64；平均体重：m。。，。d76g，m 3．0 ．a一讨sg，m ．．．二5619，m ．ti．问5469）。