【目的】：　　使用人3型腺病毒（HAdV3）衣壳展示平台展示柯萨奇病毒A组16型（CA16）的双中和抗原表位，为人3型腺病毒衣壳展示技术及基因工程疫苗的研究奠定基础，获得可以同时预防HAdV3和CA16病毒感染的双价疫苗候选株。　　【方法】：　　1. 重组质粒构建：桥式PCR扩增嵌合柯萨奇病毒A组16型（CA16）PEP55双中和抗原表位的突变型人3型腺病毒（HAdV3）的六邻体片段，酶切连接至六邻体穿梭质粒得到pBRL/RH3-CA16R1R2；与人3型腺病毒骨架质粒分别线性化后，在大肠杆菌BJ5183内同源重组，经PCR、酶切、测序鉴定得到表位嵌合型重组质粒。　　2. 重组病毒特性测试：重组质粒转染至 AD293 细胞拯救重组嵌合体病毒rAd3-CA16R1R2，大量培养重组腺病毒，检测热稳定性及生长特性等，Western blot及ELISA实验检测证明PEP55表位嵌入六邻体并暴露在重组腺病毒衣壳表面。　　3. 重组病毒免疫原性测试：重组病毒多次免疫小鼠、取抗血清进行体外中和试验评价免疫后血清的抗体水平。　　【结果】：　　1. 柯萨奇病毒A组16型中和抗原表位PEP55以置换的方式同时插入人3型腺病毒六邻体高变区1区和2区，成功构建出重组腺病毒rAd3-CA16R1R2。　　2. PEP55表位能够在腺病毒六邻体蛋白融合表达并展示于病毒粒子表面。　　3. 重组腺病毒免疫小鼠可以诱导出PEP55特异性抗体，多次免疫后免疫反应增强，且重组腺病毒免疫的抗血清能够体外中和CA16病毒感染。　　【结论】：　　表达双中和抗原表位的重组腺病毒rAd3-CA16R1R2免疫小鼠后，能够诱导产生抗CA16和HAdV3感染的特异性免疫反应。