溶血性曼氏杆菌（Mannheimia.haemolytica）属于巴氏杆菌科、曼氏杆菌属成员，是牛的条件致病菌，可导致牛运输热。牛感染后多急性发病，病死率高，给我国养牛业造成巨大的经济损失。为研究溶血性曼氏杆菌致病特点和防控溶血性曼氏杆菌病在国内流行，本研究以溶血曼氏杆菌A1、A2两种血清型标准株为研究对象制备灭活疫苗，并进行疫苗效力评价，为防控牛溶血性曼氏杆菌病提供理论基础和实验依据。　　1.牛溶血性曼氏杆菌毒力评价　　本试验采用A1、A2两种血清型标准株作为试验菌株，首先对该菌进行药敏试验，然后每个标准菌株分别设置5个不同浓度的试验组，同时生理盐水作为对照组，将55只8周龄的健康雄性BALb/c小鼠随机分为11组，每组5只；每只小鼠分别腹腔注射 0.1mLA1或者 A2血清型标准株的生理盐水菌液，并结合病理剖检和组织切片HE染色综合评价两株菌种的毒力。通过攻毒试验和病理观察分析显示，与对照组相比，A1、A2两株细菌对小鼠都有明显的致病能力，感染小鼠的肺脏、脾脏、肝脏均有明显损伤，A1血清型菌株的 LD50为 1.49×108CFU/只，A2血清型菌株的 LD50为1.96×108CFU/只。　　2.牛溶血性曼氏杆菌灭活疫苗免疫原性的评价　　将110只4周龄健康雄性BALb/c小鼠按5只/笼随机分笼，并将这22笼小鼠随机平均分为 6 个试验组（每个试验组 3 笼）和一个生理盐水对照组（4 笼）。使用A1、A2 两种血清型标准株作为疫苗株、ISA201 和 ISA61 两种佐剂，分别配成1×1010CFU/mL 和 1×109CFU/mL 两种浓度的疫苗。疫苗共六种，分别为A1/ISA201/1010、A1/ISA61/1010、A1/ISA61/109、A2/ISA201/1010、A2/ISA61/1010、A2/ISA61/1096种灭活疫苗，对6个试验组小鼠按0.2mL/只分别进行颈背部皮下接种以上六种疫苗，间隔两周进行二免。对照组小鼠进行颈背部皮下注射生理盐水。　　二免两周后，每个试验组抽取2笼小鼠，以绝对致死剂量分别对每组小鼠进行腹腔注射感染A1、A2两种菌株。攻毒后连续观察一周，记录小鼠发病状况和死亡数量，攻毒30天后，各组随机挑选3只小鼠（不足3只的全部抽取）处死并进行病理解剖；用电子秤记录小鼠体重和心、肝、脾、肺、肾重量；摘取小鼠肝、脾、肺用4%的甲醛固定，固定的组织送病理试验室做病理切片，HE染色后镜检观察。　　结果表明A1血清型菌株具有较好的免疫原性，其制备的疫苗可对试验性攻毒小鼠提供75%-100%的保护率，而A2血清型菌株制备的疫苗不能对试验性攻毒小鼠提供有效的保护；ISA201佐剂制备的疫苗相比于ISA61佐剂制备的疫苗具有更好的免疫效果和攻毒保护率，并且产生更少的结节；同时由于ISA201水包油包水佐剂相对于ISA61油包水佐剂需要更低的乳化能量，并且具有更低的黏度。