泰山紫草与不同产地软紫草的成分比较分析

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目的1.优选紫草中萘醌类成分的最佳超声提取工艺。2.建立测定紫草中左旋紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的方法,比较泰山紫草与不同产地软紫草中6种萘醌类成分的差异。3.建立泰山紫草中萘醌类成分的HPLC指纹图谱,分析泰山紫草与不同产地软紫草的共有成分。方法1.采用L9(34)正交试验法,以萘醌类成分的含量作为评价指标,考察提取溶剂、提取时间和固液比3个因素,每个因素选3个水平进行试验。2.采用高效液相色谱法:色谱柱为Symmetry C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水(70:30),流速为1.0 mL·min-1,柱温为30℃,检测波长为516 nm。3.制备泰山紫草、新疆紫草、安徽紫草的提取液,采用高效液相色谱法建立指纹图谱。结果1.提取溶剂、提取时间和固液比3个因素中提取溶剂对紫草萘醌类成分的提取影响最大,且乙腈:水(70:30)作为提取溶剂时各个成分的含量最高。2.左旋紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁质量浓度分别在2.4024μg·mL-1(r=0.9992)、9.696μg·mL-1(r=0.9992)、38380μg·mL-1(r=0.9998)、2.222μg·mL-1(r=0.9993)、8.585μg·mL-1(r=0.9996)、3.434μg·mL-1(r=0.9994)范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为96.02%、103.38%、98.34%、99.00%、88.83%、87.82%,RSD分别为2.55%、2.72%、1.74%、2.29%、2.40%、1.67%。泰山紫草中左旋紫草素、乙酰紫草素、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量分别为0.010%、0.103%、0.0097%、0.090%、0.0122%,新疆紫草中左旋紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量分别为0.025%、0.152%、0.886%、0.0110%、0.123%、0.0667%,安徽紫草中左旋紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量分别为0.029%、0.178%、0.616%、0.0103%、0.167%、0.0632%。3.在选定的色谱条件下,建立了泰山紫草、新疆紫草、安徽紫草中萘醌类成分指纹图谱的共有模式,泰山紫草确定了7个共有峰,新疆紫草和安徽紫草确定了8个共有峰。所得紫草的HPLC指纹图谱精密度、稳定性和重现性均良好,9批泰山紫草、9批新疆紫草、9批安徽紫草指纹图谱的相似度均>0.950。结论1.综合考虑各因素确定最佳提取工艺为:采用乙腈:水(70:30),超声提取时间为40min,固液比为1:40。优选的超声提取工艺稳定,简便可行。2.本实验建立了同时测定泰山紫草与不同产地软紫草中6种萘醌类成分的HPLC法。泰山紫草检测出5种萘醌类成分左旋紫草素、乙酰紫草素、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁,未检出β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁。研究表明萘醌类成分的含量在不同产地的紫草中相差比较大。新疆紫草和安徽紫草的6种萘醌类成分含量较高,说明道地药材具有其科学性,泰山紫草与道地药材具有相同成分,有一定的药用价值。3.新疆紫草、安徽紫草萘醌类成分的HPLC指纹图谱有8个共有峰,泰山紫草有7个共有峰,未检出β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁。泰山紫草与新疆紫草、安徽紫草萘醌类成分的HPLC指纹图谱有相同色谱峰,进一步证实了泰山紫草有一定的药用价值。
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