柳杉瘿瘤病组织细菌种群分析及其致病性研究

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柳杉是我国特色树种,主要分布在浙江省天目山自然保护区及周边,具有重要的生态价值和观光价值。当前,柳杉瘿瘤病开始流行成灾,严重威胁了天目山生态安全和景观文化。为进一步明确柳杉瘿瘤病形成原因,探索新的防治措施,本研究对天目山瘿瘤病组织的细菌区系及致病机制等方面进行了研究,具体结果如下:  1.系统调查了天目山柳杉瘿瘤病发病情况。发现瘿瘤病发病率达到97%,瘿瘤数量随着树的大小和树龄不同而不同,单株植物瘿瘤数量最多达到264个,平均每株27个,最大瘿瘤重量达到246 g。瘿瘤形成于当年生嫩枝上,初期为褪绿色凸起,皮层光滑,随后逐渐膨大,表层呈现出粗糙裂纹,颜色变深变黑;病组织维管束呈现多叉状分支。发病初期,植物叶片减少,叶绿素合成缓慢;随着瘿瘤变大,枝条出现枯萎症状;发病后期,整株死亡。  2.完成了瘿瘤病组织内部细菌的种群分析。通过不同培养基进行分离检测,得到瘿瘤病组织中的细菌种群及数量,组织中主要含有两大类细菌,其中假单胞杆菌(Pseudomonas spp.)的比例最高,占45%,欧文氏菌(Erwinia spp.)占比例36%。假单胞杆菌种群密度(8.12×105 CFU/g),欧文氏菌种群密度为(3.33×105 CFU/g)。  3.接种试验发现,CF01能引起柳杉幼苗的组织增生,形成瘿瘤,发病率达到14.3%~35.7%,欧文氏菌单独接种时,不引起植物病害发生,假单胞杆菌和欧文氏菌混合接种,发病率达到15.1%~40%。  4.测定了假单胞杆菌的生物学特性和生理生化特征,完成了该细菌全基因组测序的初步草图。Biolog(GENⅢ)自动微生物鉴定系统发现CF01可较强利用37种碳源,对其他34种碳源不能利用或利用能力较弱,对16种化学物质敏感。CF01可产生植物生长素IAA,浓度为4.0 mg/L,分析其可能是致瘤的主要原因。  5.测定了6种常见杀菌剂对病原细菌的抑制效果,其中效果最好的是四霉素,其次是中生菌素和农用链霉素。筛选发现了多粘类芽孢杆菌对CF01具有明显的拮抗活性。
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