狂犬病是由狂犬病病毒（Rabies virus,RABV）引起的一种重要人兽共患病,每年导致约59,000人死于该病,严重威胁着人类社会公共卫生安全。人间狂犬病基本经犬类咬、抓伤所传播,一旦发病致死率几乎为100%。目前仍无有效治疗狂犬病的药物。深入研究RABV入侵宿主细胞的机制,不仅有利于深入阐明RABV致病机制,还将有助于设计新型的狂犬病疫苗和筛选有效的狂犬病治疗药物靶点。目前已经发现多个影响RABV入侵的宿主因子,但仍然存在其它的关键宿主因子影响RABV的入侵。因此,继续挖掘影响RABV入侵的关键宿主因子具有重要意义。本研究团队前期开展了影响RABV生命周期相关宿主因子的RNA干扰（RNA interference,RNAi）筛选工作,发现了整合素 β1（integrin β1,ITGB1）在 RABV 感染人胚胎肾细胞（Human Embryonic Kidney 293 cell,HEK-293）中起重要作用。本研究通过siRNA（short interfering RNA）干扰技术分别下调表达HEK293 细胞和小鼠神经母瘤细胞（mouse Neuroblastoma cell,N2a）的 ITGB1,均能显著降低RABV的感染率和生长滴度;在HEK-293细胞中过表达ITGB1后RABV的感染率升高,表明ITGB1是影响RABV感染宿主细胞的关键宿主因子。RABV的囊膜糖蛋白（G）是介导RABV侵入宿主细胞的主要功能蛋白。本研究发现,ITGB1与G存在直接相互作用,并且这种相互作用在狂犬病毒属多个毒株之间具有保守性。细胞膜表面的整合素具有多种内化途径,其中包括网格蛋白介导的细胞内吞途径,这与RABV的经典内吞途径一致。本研究发现,RABV感染N2a细胞后促进了细胞膜表面ITGB1的内吞;多重免疫荧光染色试验也证实了 RABV和ITGB1共内吞至早期和晚期内吞体;酸性条件下RABVG与ITGB1仍存在互作,表明RABV在内吞后可与ITGB1继续保持结合。ITGB1可以作为多种病毒的受体,影响病毒的入侵感染。本研究发现ITGB1可溶性蛋白和ITGB1单克隆抗体（MAb）能够体外中和或阻断RABV的感染,并具有剂量依赖性,进一步表明ITGB1在RABV的入侵感染中发挥重要作用。ITGB1是胞外基质纤粘蛋白（fibronectin,FN）的精氨酸-谷氨酸-天冬氨酸（Arg-Gly-Asp,RGD）基序依赖性受体,RGD肽能够竞争性抑制ITGB1与FN之间的相互作用。本研究发现FN分别与ITGB1、RABVG存在相互作用;RGD肽（GRGDSP）能够体外阻断RABV的感染,并具有剂量依赖性,表明ITGB1通过FN介导RABV的入侵感染。ITGB1为I型膜蛋白,广泛分布于不同组织细胞,是脊椎动物外周和中枢神经系统发育的重要蛋白,但是在成年动物的肌肉和成熟神经细胞之间存在差异表达。本研究的小鼠体内实验表明,ITGB1在肌肉组织中大量表达,并与RABV抗原在RABV街毒GX/09接种的肌肉组织中呈共定位,提示ITGB1可能影响RABV 的外周感染。烟碱乙酰胆碱受体α1（nicotinic acetylcholine receptor α1,nAChRα1）为RABV已知的唯一外周受体,本研究发现ITGB1与nAChRα1存在相互作用,表明ITGB1可能是RABV外周感染的重要宿主因子。此外,小鼠实验显示,ITGB1可溶性蛋白能够中和GX/09致死剂量的感染;ITGB1 MAb和GRGDSP均能够阻断GX/09外周感染的致死攻击,但不能够阻断GX/09中枢感染的致死攻击。以上研究结果进一步表明ITGB1是RABV外周感染的关键宿主因子。本研究对RABV外周侵入机制的研究丰富了 RABV侵入宿主机制的理论体系,为RABV抗病毒药物的研究提供了参考,同时为深入研究RABV的致病机制奠定了基础。