【摘 要】
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目的:探讨一种安全有效地对体外培养神经干细胞球进行离散的方法。方法:采用常规胰蛋白酶消化、单纯巴斯德吸管吹打、滤网研磨、控制神经球体积的胰酶短时消化4种方法,比较其
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院神经内科,重庆医科大学神经科学研究中心,神经生物学重庆市市级重点实验室,
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目的:探讨一种安全有效地对体外培养神经干细胞球进行离散的方法。方法:采用常规胰蛋白酶消化、单纯巴斯德吸管吹打、滤网研磨、控制神经球体积的胰酶短时消化4种方法,比较其各自的离散效果和离散后细胞存活情况。结果:胰酶消化较长时间虽然可以得到单细胞但是细胞难以存活,单纯巴斯德吸管吹打不能完全离散神经球,不锈钢滤网研磨细胞损伤大,存活率低下,而采用控制神经球体积结合胰蛋白酶短时消化可以轻易获得单细胞并且细胞存活率明显高于其他方法(93.2%,P<0.05)。结论:控制神经球体积的胰酶短时消化法是离散神经干细胞球的一种安全有效的方法。
OBJECTIVE: To explore a safe and effective method for discretely culturing NSCs in vitro. Methods: Four kinds of methods of trypsin digestion, simple Pasteur pipetting, mesh grinding and trypsin digestion were used to control the volume of neurospheres. The discrete effect and the cell survival were compared. Results: While trypsin digestion for a long time can get single cells but the cells are difficult to survive, simple Pasteur pipette can not completely separate the neurospheres, stainless steel mesh grinder injury, low survival rate, and the control of the volume of the ball combined with pancreatic Short proteolytic digestion can easily obtain single cells and cell viability was significantly higher than other methods (93.2%, P <0.05). CONCLUSIONS: Trypanase digestion, which controls the volume of neurospheres, is a safe and effective method of discrete neural stem cell spheres.
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