目的：了解该院2014年临床分离细菌构成及对常用抗菌药物的敏感性和耐药性，为临床用药提供参考依据。方法收集2014年全年临床送检标本分离的细菌，采用PHOENIX全自动细菌鉴定药敏系统、全自动血液培养仪或手工方法进行分离鉴定，对临床分离细菌采用自动化仪器法或K‐B纸片扩散法进行药物敏感试验，采用WHONT5．6软件进行统计分析，按CLSI2012年标准判定结果。结果共分离细菌2529株，革兰阳性菌537株（21．23％），革兰阴性菌1992株（78．77％）。葡萄球菌属中甲氧西林耐药株（MRSA和MRCNS）对测试药物的耐药率均显著高于甲氧西林敏感株（MSSA和MSCNS），已发现对替考拉宁耐药菌株；肠球菌属中屎肠球菌的分离率、耐药性大多数超过粪肠球菌，二者均存在万古霉素和替考拉宁耐药菌株；肠杆菌科细菌产ESBLs株对测试药物的耐药率均比非产ESBLs株高，对碳青霉烯类药物敏感性高；非发酵菌中鲍曼不动杆菌耐药性突出，明显高于铜绿假单胞菌。结论该院临床细菌耐药呈增长趋势，应定期进行耐药性监测并采取有效的控制措施，抑制细菌耐药，为临床用药提供参考。